王曉玲 張萍
摘 要：實驗研究了在pH=3.6的鄰苯二甲酸氫鉀-HCl緩衝液中，鹽酸地爾硫卓與伊紅可形成穩定的電荷轉移絡合物，據此建立了鹽酸地爾硫卓荷移光度分析的新方法。絡合物最大吸收波長為550 nm，表觀摩爾吸光係數為4.61×104 L·mol-1·cm-1，其線性方程為Y = 0.488 3X+0.024 5， 相關係數，R=0.999 8，鹽酸地爾硫卓的量在1.5～7.5 mg·L-1質量濃度範圍內符合朗伯比爾定律，該法選擇性和重現性好，靈敏度較高，可用於快速檢測藥品中鹽酸地爾硫卓的含量。
關 鍵 詞：鹽酸地爾硫卓;伊紅;荷移光度法
中圖分類號：O 657.32 文獻標識碼：A 文章編號： 1671-0460（2019）01-0218-03
Abstract：A novel spectrophotometric method for the determination of diltiazem hydrochloride was established based on the charge transfer reaction between diltiazem hydrochloride and eosin Y in pH=3.6 potassium hydyogen phthalate-HCl. The results showed that the apparent molar absorptivity of the color complex was 4.61×104 L·mol-1·cm-1 at 550 nm. The linear regression equation was Y=0.488 3X+0.024 5， the correlation coefficient was 0.999 8， the adsorption conformed to Lambert-Beer law in the range of 1.5～7.5 mg·L-1.The method is simple， rapid， high sensitive and suitable for determination of diltiazem hydrochioride content in medicine.
Key words： Diltiazem hydrochloride; Eosin Y; Charge-transfer spectrophotometric method
鹽酸地爾硫卓是一類典型高選擇性的苯並硫氮卓類鈣拮抗劑（又名合心爽），具有優良的藥效學特點和廣泛的臨床適應性，主要用於治療冠心病、高血壓、心律失常、勞力型心絞痛等。目前，鹽酸地爾硫卓的分析方法相對較少，主要有流動注射-化學發光法[1]、高效液相色譜法[2，3]、反相高效液相色譜法[4，5]、荷移分光光度法[6]等。伊紅和鹽酸地爾硫卓的荷移反應研究鮮見報道。研究發現伊紅分子中由於溴取代基的強誘導效應，使得苯環平面成為缺電子體系，可以作為電子接受體，鹽酸地爾硫卓分子中叔氨基上的氮原子含有孤對電子可以作為電子給予體，在此理論基礎上，發現二者的荷移反應介質不同於文獻中報道的基本上都是有機溶劑，而是可在鄰苯二甲酸氫鉀-HCl （pH=3.6）緩衝介質中發生電荷轉移反應，形成新的絡合物分子，此荷移反應的靈敏度相對較高，據此建立了荷移光度法測定鹽酸地爾硫卓的分析方法，測定了鹽酸地爾硫和伊紅的絡合比為1∶1，初步探討了鹽酸地爾硫和伊紅的反應機理，方法用於測定藥品中鹽酸地爾硫卓的含量，結果滿意。
1 實驗部分
1.1 主要儀器與試劑
鄰苯二甲酸氫鉀-HCl （pH=3.6）緩衝溶液。1.2 實驗方法用兩隻刻度相同的25 mL具塞比色管，分別加入伊紅溶液1.5 mL，pH=3.6的鄰苯二甲酸氫鉀-HCl緩衝溶液1.0 mL， 向其中一支加入一定量的鹽酸地爾硫卓溶液，另一支不加，用去離子水稀釋至10 mL，搖勻，放置在40 ℃水浴中加熱15 min，取出後用自來水迅速冷卻15 min。以試劑空白為參比，用1 cm比色皿在分光光度計上，在550 nm處測定吸光度值A。
2 結果與討論
2.1 吸收曲線
按照實驗方法，測定不同波長下的吸光度A0和吸光度A，作出吸收光譜圖。如圖1所示，鹽酸地爾硫卓在可見光區沒有吸收，伊紅的最大吸收波長為518 nm鹽酸地爾硫卓能與伊紅反應生成電荷轉移絡合物的最大吸收波長550 nm，荷移絡合物的最大吸收波長比試劑空白的最大吸收波長紅移了32 nm。實驗選擇測定550 nm為測定波長。
1： 伊紅+鄰苯二甲酸氫鉀（pH=3.6）
2： 伊紅+鄰苯二甲酸氫鉀（pH=3.6）+鹽酸地爾硫卓
2.2 反應條件的選擇
2.2.1 最佳介質條件
按照實驗方法，試驗了KCl-HCl（pH=1.7）、鄰苯二甲酸氫鉀-HCl（pH=3.6）、NaAc-HAc（pH=4.2）、鄰苯二甲酸鹽（pH=5.6）、Na2HPO4-NaH2PO4（pH=6.2）、NH3·H2O-NH4Cl（pH=8.0）、硼砂-NaOH（pH=9.8）、NaHCO3-NaOH（pH=11.0） 、KCl-NaOH（pH=13.0）、甲醇、乙醇、丙酮等體系對反應的影響。結果表明：在鹼性介質里，反應體系基本上沒有色差，而在中性與酸性介質中出現了比較明顯的色差，且在pH為3.6的鄰苯二甲酸氫鉀-HCl的緩衝溶液中的顏色對比最為明顯。 選擇pH=3.6的鄰苯二甲酸氫鉀-HCl作為反應介質
2.2.2 緩衝溶液的用量
改變鄰苯二甲酸氫鉀-HCl （pH=3.6）的用量，如圖2所示，當鄰苯二甲酸氫鉀-HCl （pH=3.6）用量在1.0 mL的A值最大且穩定，實驗選擇鄰苯二甲酸氫鉀-HCl （pH=3.6）的最佳用量為1.0 mL。
2.2.3 伊紅的用量
改變伊紅的用量，如圖3所示，當伊紅用量在1.5 mL時反應進行完全，吸光度A值達到最大，在增加伊紅的用量，吸光度慢慢減小，靈敏度降低，實驗選擇伊紅的最佳用量為1.5 mL。
2.2.4 反應溫度
按照實驗方法，分別試驗了20， 30，40， 50 ，60℃不同溫度對實驗測定的影響，結果表明，反應在升到40 ℃時吸光度達最大且穩定，溫度大於40 ℃時吸光度逐漸減小，實驗選擇反應溫度為40 ℃。
2.2.5 反應時間
實驗考察了反應時間分別為5、10、15、20、25、30、35 min時對吸光度值的影響，結果顯示反應進行15 min 時吸光度值基本穩定， 實驗選擇加熱時間為15 min，迅速冷卻15 min後測定。
2.2.6 反應順序
按照實驗方法，對0.05 mg·10 mL-1鹽酸地爾硫卓進行測定，變換添加反應物的順序，其吸光度測定結果如表1所示。
2.3 工作曲線和檢出限
按照實驗方法對鹽酸地爾硫卓標準溶液系列進行測定，結果表明：鹽酸地爾硫卓的質量濃度在1.5～7.5 mg·L-1範圍內與A呈現良好的線性關係，線性回歸方程Y=0.488 3X+0.024 5， 相關係數R=0.999 8，表觀摩爾吸光係數為4.61×104 L·mol-1·cm-1。按照實驗方法測定空白溶液11次，以3倍的標準偏差除以斜率計算方法的檢出限為4.6×10-2 mg·L-1
2.4 干擾離子
按照實驗方法對4.5 mg·L-1鹽酸地爾硫卓進行測定，在±5%的相對誤差範圍內，考察了藥物賦形劑與常見的離子對該反應的干擾情況。實驗表明，1 300倍的蔗糖、130倍的乳糖、110倍的澱粉、、90倍的葡萄糖、900倍的氯化鈉、300倍的K+、220倍的SO4-、20倍的NO3-和均不干擾測定。
2.5 測定鹽酸地爾硫卓與伊紅的絡合比
採用等摩爾連續變換法和摩爾比法測定鹽酸地爾硫卓與伊紅生成的電荷轉移絡合物的組成比為1∶1。
2.6 反應機理的探討
鹽酸地爾硫卓中的氮原子上有一對孤對電子，可作為 n-電子給予體; 伊紅是一平面缺電子體系，可作為電子接受體，鹽酸地爾硫卓與伊紅反應，可形成1∶1的 n-π電荷轉移絡合物，根據其絡合比推測鹽酸地爾硫卓與伊紅反應機理如下：
2.7 精密度試驗
按照實驗方法測定對4.5 mg·L-1的鹽酸地爾硫卓標準溶液進行測定，6次測定結果的相對標準偏差為0.84%，表明方法的精密度較好
2.8 樣品分析
取鹽酸地爾硫卓藥片（標示量30 mg /片）10片，準確稱量後研細混勻，求得每片的平均質量，準確稱取相當於半片的質量用水溶解定容到250 mL的容量瓶中，過濾，移取適量的濾液按照實驗方法進行測定，平行： 測定6次。測定結果如表2。
3 結 論
工作建立了荷移光度法測定鹽酸地爾硫卓的含量，方法準確、簡便、靈敏度較高、選擇性和重現性較好、可用於藥片中鹽酸地爾硫卓含量的測定。
參考文獻
[1] 高申霞， 呂九如. 流動注射-化學發光法測定鹽酸地爾硫卓[J]. 分析試驗室， 2007， 26（4）： 21-24.
[2]唐翎， 張婷， 李新中. 高效液相色譜法測定鹽酸地爾硫卓注射液的含量[J]. 中南大學學報（醫學版）， 2006， 31（5）： 756-758.
[3]談恆山， 楊潔， 肖克岳， 等， 高效液相色譜法測定人體地爾硫卓及其主要代謝產物的藥物動力學[J]. 中國醫院藥學雜誌， 1998， 18（1）： 3-5.
[4]李克， 袁倚盛， 王宏剛， 等， 反相高效液相色譜法測定血漿中地爾硫卓及其藥代動力學研究[J]. 藥物分析雜誌， 1992， 12（1）： 12-14.
[5]金克寧， 張本全， 饒度寧. 反相高效液相色譜法同時測定人血清中地爾硫卓及卡馬西平濃度[J]. 藥物分析， 1994， 14（3）： 21.
[6]李玉賾. 鉻天青S荷移分光光度法測定鹽酸地爾硫卓含量[J]. 理化檢驗（化學分冊）， 2013， 49（8）： 979-984.
摘 要：實驗研究了在pH=3.6的鄰苯二甲酸氫鉀-HCl緩衝液中，鹽酸地爾硫卓與伊紅可形成穩定的電荷轉移絡合物，據此建立了鹽酸地爾硫卓荷移光度分析的新方法。絡合物最大吸收波長為550 nm，表觀摩爾吸光係數為4.61×104 L·mol-1·cm-1，其線性方程為Y = 0.488 3X+0.024 5， 相關係數，R=0.999 8，鹽酸地爾硫卓的量在1.5～7.5 mg·L-1質量濃度範圍內符合朗伯比爾定律，該法選擇性和重現性好，靈敏度較高，可用於快速檢測藥品中鹽酸地爾硫卓的含量。
關 鍵 詞：鹽酸地爾硫卓;伊紅;荷移光度法
中圖分類號：O 657.32 文獻標識碼：A 文章編號： 1671-0460（2019）01-0218-03
Abstract：A novel spectrophotometric method for the determination of diltiazem hydrochloride was established based on the charge transfer reaction between diltiazem hydrochloride and eosin Y in pH=3.6 potassium hydyogen phthalate-HCl. The results showed that the apparent molar absorptivity of the color complex was 4.61×104 L·mol-1·cm-1 at 550 nm. The linear regression equation was Y=0.488 3X+0.024 5， the correlation coefficient was 0.999 8， the adsorption conformed to Lambert-Beer law in the range of 1.5～7.5 mg·L-1.The method is simple， rapid， high sensitive and suitable for determination of diltiazem hydrochioride content in medicine.
Key words： Diltiazem hydrochloride; Eosin Y; Charge-transfer spectrophotometric method
鹽酸地爾硫卓是一類典型高選擇性的苯並硫氮卓類鈣拮抗劑（又名合心爽），具有優良的藥效學特點和廣泛的臨床適應性，主要用於治療冠心病、高血壓、心律失常、勞力型心絞痛等。目前，鹽酸地爾硫卓的分析方法相對較少，主要有流動注射-化學發光法[1]、高效液相色譜法[2，3]、反相高效液相色譜法[4，5]、荷移分光光度法[6]等。伊紅和鹽酸地爾硫卓的荷移反應研究鮮見報道。研究發現伊紅分子中由於溴取代基的強誘導效應，使得苯環平面成為缺電子體系，可以作為電子接受體，鹽酸地爾硫卓分子中叔氨基上的氮原子含有孤對電子可以作為電子給予體，在此理論基礎上，發現二者的荷移反應介質不同於文獻中報道的基本上都是有機溶劑，而是可在鄰苯二甲酸氫鉀-HCl （pH=3.6）緩衝介質中發生電荷轉移反應，形成新的絡合物分子，此荷移反應的靈敏度相對較高，據此建立了荷移光度法測定鹽酸地爾硫卓的分析方法，測定了鹽酸地爾硫和伊紅的絡合比為1∶1，初步探討了鹽酸地爾硫和伊紅的反應機理，方法用於測定藥品中鹽酸地爾硫卓的含量，結果滿意。
1 實驗部分
1.1 主要儀器與試劑
鄰苯二甲酸氫鉀-HCl （pH=3.6）緩衝溶液。1.2 實驗方法用兩隻刻度相同的25 mL具塞比色管，分別加入伊紅溶液1.5 mL，pH=3.6的鄰苯二甲酸氫鉀-HCl緩衝溶液1.0 mL， 向其中一支加入一定量的鹽酸地爾硫卓溶液，另一支不加，用去離子水稀釋至10 mL，搖勻，放置在40 ℃水浴中加熱15 min，取出後用自來水迅速冷卻15 min。以試劑空白為參比，用1 cm比色皿在分光光度計上，在550 nm處測定吸光度值A。
2 結果與討論
2.1 吸收曲線
按照實驗方法，測定不同波長下的吸光度A0和吸光度A，作出吸收光譜圖。如圖1所示，鹽酸地爾硫卓在可見光區沒有吸收，伊紅的最大吸收波長為518 nm鹽酸地爾硫卓能與伊紅反應生成電荷轉移絡合物的最大吸收波長550 nm，荷移絡合物的最大吸收波長比試劑空白的最大吸收波長紅移了32 nm。實驗選擇測定550 nm為測定波長。
1： 伊紅+鄰苯二甲酸氫鉀（pH=3.6）
2： 伊紅+鄰苯二甲酸氫鉀（pH=3.6）+鹽酸地爾硫卓
2.2 反應條件的選擇
2.2.1 最佳介質條件
按照實驗方法，試驗了KCl-HCl（pH=1.7）、鄰苯二甲酸氫鉀-HCl（pH=3.6）、NaAc-HAc（pH=4.2）、鄰苯二甲酸鹽（pH=5.6）、Na2HPO4-NaH2PO4（pH=6.2）、NH3·H2O-NH4Cl（pH=8.0）、硼砂-NaOH（pH=9.8）、NaHCO3-NaOH（pH=11.0） 、KCl-NaOH（pH=13.0）、甲醇、乙醇、丙酮等體系對反應的影響。結果表明：在鹼性介質里，反應體系基本上沒有色差，而在中性與酸性介質中出現了比較明顯的色差，且在pH為3.6的鄰苯二甲酸氫鉀-HCl的緩衝溶液中的顏色對比最為明顯。 選擇pH=3.6的鄰苯二甲酸氫鉀-HCl作為反應介質
2.2.2 緩衝溶液的用量
改變鄰苯二甲酸氫鉀-HCl （pH=3.6）的用量，如圖2所示，當鄰苯二甲酸氫鉀-HCl （pH=3.6）用量在1.0 mL的A值最大且穩定，實驗選擇鄰苯二甲酸氫鉀-HCl （pH=3.6）的最佳用量為1.0 mL。
2.2.3 伊紅的用量
改變伊紅的用量，如圖3所示，當伊紅用量在1.5 mL時反應進行完全，吸光度A值達到最大，在增加伊紅的用量，吸光度慢慢減小，靈敏度降低，實驗選擇伊紅的最佳用量為1.5 mL。
2.2.4 反應溫度
按照實驗方法，分別試驗了20， 30，40， 50 ，60℃不同溫度對實驗測定的影響，結果表明，反應在升到40 ℃時吸光度達最大且穩定，溫度大於40 ℃時吸光度逐漸減小，實驗選擇反應溫度為40 ℃。
2.2.5 反應時間
實驗考察了反應時間分別為5、10、15、20、25、30、35 min時對吸光度值的影響，結果顯示反應進行15 min 時吸光度值基本穩定， 實驗選擇加熱時間為15 min，迅速冷卻15 min後測定。
2.2.6 反應順序
按照實驗方法，對0.05 mg·10 mL-1鹽酸地爾硫卓進行測定，變換添加反應物的順序，其吸光度測定結果如表1所示。
2.3 工作曲線和檢出限
按照實驗方法對鹽酸地爾硫卓標準溶液系列進行測定，結果表明：鹽酸地爾硫卓的質量濃度在1.5～7.5 mg·L-1範圍內與A呈現良好的線性關係，線性回歸方程Y=0.488 3X+0.024 5， 相關係數R=0.999 8，表觀摩爾吸光係數為4.61×104 L·mol-1·cm-1。按照實驗方法測定空白溶液11次，以3倍的標準偏差除以斜率計算方法的檢出限為4.6×10-2 mg·L-1
2.4 干擾離子
按照實驗方法對4.5 mg·L-1鹽酸地爾硫卓進行測定，在±5%的相對誤差範圍內，考察了藥物賦形劑與常見的離子對該反應的干擾情況。實驗表明，1 300倍的蔗糖、130倍的乳糖、110倍的澱粉、、90倍的葡萄糖、900倍的氯化鈉、300倍的K+、220倍的SO4-、20倍的NO3-和均不干擾測定。
2.5 測定鹽酸地爾硫卓與伊紅的絡合比
採用等摩爾連續變換法和摩爾比法測定鹽酸地爾硫卓與伊紅生成的電荷轉移絡合物的組成比為1∶1。
2.6 反應機理的探討
鹽酸地爾硫卓中的氮原子上有一對孤對電子，可作為 n-電子給予體; 伊紅是一平面缺電子體系，可作為電子接受體，鹽酸地爾硫卓與伊紅反應，可形成1∶1的 n-π電荷轉移絡合物，根據其絡合比推測鹽酸地爾硫卓與伊紅反應機理如下：
2.7 精密度試驗
按照實驗方法測定對4.5 mg·L-1的鹽酸地爾硫卓標準溶液進行測定，6次測定結果的相對標準偏差為0.84%，表明方法的精密度較好
2.8 樣品分析
取鹽酸地爾硫卓藥片（標示量30 mg /片）10片，準確稱量後研細混勻，求得每片的平均質量，準確稱取相當於半片的質量用水溶解定容到250 mL的容量瓶中，過濾，移取適量的濾液按照實驗方法進行測定，平行： 測定6次。測定結果如表2。
3 結 論
工作建立了荷移光度法測定鹽酸地爾硫卓的含量，方法準確、簡便、靈敏度較高、選擇性和重現性較好、可用於藥片中鹽酸地爾硫卓含量的測定。
參考文獻
[1] 高申霞， 呂九如. 流動注射-化學發光法測定鹽酸地爾硫卓[J]. 分析試驗室， 2007， 26（4）： 21-24.
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[3]談恆山， 楊潔， 肖克岳， 等， 高效液相色譜法測定人體地爾硫卓及其主要代謝產物的藥物動力學[J]. 中國醫院藥學雜誌， 1998， 18（1）： 3-5.
[4]李克， 袁倚盛， 王宏剛， 等， 反相高效液相色譜法測定血漿中地爾硫卓及其藥代動力學研究[J]. 藥物分析雜誌， 1992， 12（1）： 12-14.
[5]金克寧， 張本全， 饒度寧. 反相高效液相色譜法同時測定人血清中地爾硫卓及卡馬西平濃度[J]. 藥物分析， 1994， 14（3）： 21.
[6]李玉賾. 鉻天青S荷移分光光度法測定鹽酸地爾硫卓含量[J]. 理化檢驗（化學分冊）， 2013， 49（8）： 979-984.
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