【摘要】目的建立一種測定桑枝中多糖含量的 方法 。方法採用水提醇沉法對桑枝中的多糖進行提取，用Sevag法等進行純化，蒽酮-濃硫酸法測定多糖的含量。結果回歸方程：A=0.024 94C+0.057 1，r=0.999 5，線性範圍為0.08～0.4 μg·L-1。桑枝多糖的含量為18.74%（RSD=2.1%)，平均回收率為98.6%，RSD=1.4%。結論 該法簡便、快速、重現性好，為桑枝的質量控制提供了方法。
【關鍵詞】桑枝； 多糖； 蒽酮濃硫酸法
Abstract：ObjectiveTo establish a kind of determining method of contents of polysaccharides in Mulberry Twig. Methods The polysaccharide in Mulberry Twig was extracted with water and ethanol precipitation. Anthrone-sulfonic acid was applied to analysis of the contents of polysaccharides. ResultsThe content of polysaccharides in Mulberry Twig was 18.74 mg/g, average recovery was 98.6%, RSD=1.4%. ConclusionThe results showed that this method is simple, specific and accurate. It provides a method for mass control of Mulberry Twig.
Key words：Mulbery Twig； Polysaccharide； Anthrone-sulfonic acid method
桑枝為桑科植物桑Morus alba L.的嫩枝，Mulberry Twig桑枝：又名桑條，桑枝的藥用 歷史 悠久，《 中國 藥典》記載為祛風濕，利關節的常用藥，用於 治療 肩臂關節酸痛麻木［1］。臨床 應用 於關節腫痛、手足麻木、風濕痹痛、癱瘓等多種疾病。多糖是多種中草藥的有效成分之一，多糖有十分廣泛的生物活性，能促進人體的免疫功能，具有抗腫瘤、抗病毒、抗突變、抗輻射及降血壓等功效［2，3］。對桑枝中多糖的 研究 具有重要的意義。有關桑枝多糖的化學研究，未見報道。為有效開發利用桑枝藥材資源，揭示桑枝多糖與藥效的關係，本文採用超聲提取法提取桑枝中的多糖，蒽酮-濃硫酸法測定多糖的含量［4，5］。
1 儀器與試劑
TU1800SPC型紫外分光光度計；超聲波清洗器；TOL40B離心機（上海安亭 科學 儀器廠）。無水葡萄糖、乙醇、蒽酮、濃硫酸、氯仿、正丁醇均為 分析 純。蒽酮濃硫酸試劑（0.2 g∶100 ml）。桑枝，200405采於新疆喀什。
2 方法
2.1 桑枝多糖的提取稱取乾燥至恆重並過40目篩的桑枝粉末100 g，加水適量，於95℃時超聲提取30 min，過濾，濾渣於95℃超聲再提取30 min，相同條件下提取3次，合併提取液，於旋轉蒸發儀上濃縮至100 ml，在其中加95%乙醇至含醇量為85%，4℃時靜置過夜。於40 000 r/min的條件下離心分離，離心後的沉澱物加少量熱水溶解，再加95%乙醇至含醇量為85%，靜置過夜，離心分離，得粗多糖。
2.2 多糖的精製植物粗多糖中一般含有蛋白質，以游離態和結合態存在，將蛋白酶法和Sevag法結合起來，不但可脫去游離蛋白，而且可脫去結合蛋白質。將上述得到的粗多糖溶於水，加入2%木瓜蛋白酶，60℃時酶解2 h，再用Sevag法（氯仿∶正丁醇=4∶1）除蛋白15次。加1%活性碳脫色，抽濾，加入95%乙醇使含醇量達85%，4℃時靜置過夜，離心分離。沉澱物冷凍乾燥，即得精製淡黃色的桑枝多糖。
將多糖溶液進行200～400 nm紫外區掃描，無特徵吸收峰，茚三酮反應為陰性，說明桑枝多糖中的蛋白質已除乾淨。
3 結果與討論
3.1 標準溶液的製備精密稱取葡萄糖對照品0.100 0 g，用蒸餾水溶解並定容至100 ml，配成濃度為1.000 mg/ml的標準儲備液。
3.2 標準曲線的繪製精密吸取上述葡萄糖標準儲備液0.0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5 ml於100 ml的容量瓶中，用蒸餾水定溶至刻度。分別取2.0 ml於25 ml具塞試管中，加蒽酮-濃硫酸試劑4 ml，放入沸水浴中加熱8 min，迅速冷卻至室溫。於620 nm處測定吸光度值， 計算 回歸方程：A=0.024 94C+0.057 1，r=0.999 5，線性範圍為0.08～0.4 μg·L-1。
3.3 換算因子的測定精密稱取精製後的桑枝多糖0.010 0 g，用少量熱蒸餾水溶解後，定溶於100 ml容量瓶中，搖勻。精密吸取此溶液2 ml於25 ml具塞試管中，加蒽酮-濃硫酸試劑4 ml，沸水浴中加熱8 min，迅速冷卻至室溫，於620 nm處測定吸收度。根據標準曲線計算濃度，再按下式計算換算因子，得f=9.618 9。
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