子宮積液是犬常見的產科疾病。根據B 超圖像特徵結合臨床症狀, 可將子宮積液大致分為二類: 一是子宮積水, 子宮壁很薄, 宮腔內液體回聲很低(暗區) ,除有的病例腹圍增大外, 一般無臨床症狀; 二是子宮積膿, 子宮壁較厚, 宮腔內液體部分有一定強度的回聲, 多數病例有臨床症狀, 如食慾不佳, 體溫升高, 精神不振, 行為反常等。
犬子宮積液及子宮積膿已成為影響犬繁殖能力和引起犬死亡的疾病之一。通過臨床疾病診治的記錄可以看出, 犬子宮積液發病率逐漸提高, 發病年齡也由老犬向青年犬過渡, 對此為防止本病的擴大, 本試驗採集臨床病犬子宮積液病料, 進行細菌的分離、鑑定, 確定子宮積液中的病原菌及這些細菌與子宮積液之間的關係, 為探明其發病機理和臨床上更好地防治本病提供了理論依據。
實驗材料與方法
1.試驗病料 子宮內容物來源於東北農業大學動物醫院就診的病犬, 選擇臨床症狀符合子宮積液的病例。經過體檢、血液學檢驗和超聲波檢查確診後對其實施卵巢子宮切除術獲得子宮及其內容物。共採集5隻犬的病料。
2.培養基及試劑 分離培養基為普通瓊脂培養基、羊鮮血瓊脂培培養基、鮮血2葡萄糖瓊脂培養基、營養肉湯和血清肉湯、麥康凱瓊脂培養基; 生化鑑定培養基及試劑為尿素酶高層斜面、明膠培養基、蔗糖、乳糖、葡萄糖發酵管、葡萄糖蛋白腖水、甲基紅試劑、V 2P 試劑、吲哚試劑、過氧化氫試劑、硫化氫試劑和枸櫞酸鹽試劑等。
試驗方法
1.細菌的分離
由於膿汁的含菌量較多, 採用分區劃線法將病料接種到滅菌羊血營養瓊脂培養基和普通瓊脂培養基並於37℃培養24 h, 用革蘭氏染色法塗片鏡檢, 觀察。同時分別挑取單個菌落接種於麥康凱培養基後觀察。
2.細菌的純化
將挑選出來的細菌, 按革蘭氏染色特點和細菌的形態分類, 再次接種於普通鮮血瓊脂培養基上培養純化, 純培養後鏡檢無雜菌者保存於斜面保菌培養基中, 經37℃培養8～ 24 h, 再置於4℃冰箱保存。以備生化鑑定。
3.細菌的生化鑑定
主要的生化試驗有革蘭氏染色、溶血試驗、各種糖發酵試驗、過氧化氫試驗、甲基紅試驗、V 2P 試驗、吲哚試驗、硫化氫試驗、明膠液化試驗、尿素酶試驗、石蕊牛乳試驗和枸櫞酸鹽試驗。
試驗結果
1.分離培養的結果 肉湯均勻渾濁, 有絮狀沉澱,液面有菌環。在普通瓊脂上培養可見圓形、稍隆起、表面光滑、邊緣整齊、無色或接近灰白色的菌落。血瓊脂平板上生長形成圓形凸起、光滑、濕潤、半透明、灰白色菌落, 直徑為2～ 3 mm。在麥康凱瓊脂上形成紅色菌落。
2.生化鑑定的結果 經革蘭氏染色可見革蘭氏陰性的短桿菌, 兩端鈍圓。散在或成對存在。C型溶血,無溶血環。生化鑑定的結果見表1。
3.細菌鑑定結果 經分離培養和生化鑑定, 查細菌鑑定手冊第8 版確認, 分離出的是埃希氏大腸桿菌。經分離培養和生化鑑定, 5 種病料結果均為埃希氏大腸桿菌。
討論
1.細菌的致病性和來源
大腸桿菌是人和溫血動物腸道正常菌群, 隨糞便排出體外, 也是環境常在菌。試驗所分離出的埃希氏大腸桿菌毒力很弱, 是一種條件致病菌, 受到某些誘發因素的刺激下, 就可能導致宿主內環境發生異常, 引起發病。正常生理情況下犬陰道內也存在這些常在菌, 從陰道正常菌群中分離出大腸桿菌和子宮內分離出的大腸桿菌屬同種類型。在發情前期和發情期細菌通過子宮頸進入子宮,造成污染, 是一種正常現象。由於發情期時犬的子宮頸處於開放狀態, 此時陰道的常在菌有很大機會進入子宮, 如果此時子宮內膜已經處於增生的狀態, 則入侵的細菌很可能會導致子宮內的炎症過程, 促進子宮積液的發生。
2.細菌與子宮積液的關係
等均用機械劃傷的方法成功造成黃體期子宮內膜的局部增生, 將從子宮積液犬的子宮中分離出的埃希氏大腸桿菌接種到這些犬的子宮腔內, 結果有很大比例的犬可以發展為子宮積液。因此他們斷定, 一定存在某些與子宮內膜創傷或刺激有關的因素, 與細菌共同作用, 產生了引發子宮積液的適宜刺激。現已證明這種影響因素就是孕酮和雌激素。顯然長期或反覆因孕酮和雌激素刺激引起子宮病理性變化是子宮積液發生的主要機制和初始原因。雖然細菌尤其大腸桿菌是子宮積液中經常分離到的細菌, 但其不可能是發生子宮積液的初始原因, 因為正常犬子宮污染時並不會引起該病。而且子宮積液初期子宮內容物常為無菌狀態, 只有子宮內膜被某些因素如孕酮、雌激素等預處理後, 造成黃體期子宮內膜的局部增生, 子宮內膜的腺體會產生大量分泌物, 才有利於細菌的入侵和大量繁殖, 然後細菌才分泌毒素並刺激子宮內膜, 促進子宮積液量的增加而引起疾病的進一步發展。
3.只分離出大腸桿菌的可能原因
一是子宮的防禦機制, 在疾病的初期細菌侵入子宮後, 機體釋放各種激素如雌激素, 它可提高白細胞向子宮腔移動的速率, 增加子宮腔殺菌的能力, 這樣某些細菌就可能被子宮的一些防禦機制所清除。二是子宮中的無菌環境可能與抗生素的應用有關, 因為病犬發病後採用過抗生素治療, 降低了細菌的檢出率。而子宮內膜和子宮肌層內存在特異性的大腸桿菌受體, 從理論上增加了其在子宮內建群的可能性, 所以最終只有大腸桿菌被檢出。
4.發病的主要原因
由試驗結果看, 5隻病犬的病料經分離鑑定均為大腸桿菌, 而大腸桿菌又不能直接引發子宮積液, 由此看子宮積液的主要發病機制還應是長期或反覆孕酮刺激和雌激素的共同作用的結果。細菌作用只不過是一種繼發因素。
犬子宮積液及子宮積膿已成為影響犬繁殖能力和引起犬死亡的疾病之一。通過臨床疾病診治的記錄可以看出, 犬子宮積液發病率逐漸提高, 發病年齡也由老犬向青年犬過渡, 對此為防止本病的擴大, 本試驗採集臨床病犬子宮積液病料, 進行細菌的分離、鑑定, 確定子宮積液中的病原菌及這些細菌與子宮積液之間的關係, 為探明其發病機理和臨床上更好地防治本病提供了理論依據。
實驗材料與方法
1.試驗病料 子宮內容物來源於東北農業大學動物醫院就診的病犬, 選擇臨床症狀符合子宮積液的病例。經過體檢、血液學檢驗和超聲波檢查確診後對其實施卵巢子宮切除術獲得子宮及其內容物。共採集5隻犬的病料。
2.培養基及試劑 分離培養基為普通瓊脂培養基、羊鮮血瓊脂培培養基、鮮血2葡萄糖瓊脂培養基、營養肉湯和血清肉湯、麥康凱瓊脂培養基; 生化鑑定培養基及試劑為尿素酶高層斜面、明膠培養基、蔗糖、乳糖、葡萄糖發酵管、葡萄糖蛋白腖水、甲基紅試劑、V 2P 試劑、吲哚試劑、過氧化氫試劑、硫化氫試劑和枸櫞酸鹽試劑等。
試驗方法
1.細菌的分離
由於膿汁的含菌量較多, 採用分區劃線法將病料接種到滅菌羊血營養瓊脂培養基和普通瓊脂培養基並於37℃培養24 h, 用革蘭氏染色法塗片鏡檢, 觀察。同時分別挑取單個菌落接種於麥康凱培養基後觀察。
2.細菌的純化
將挑選出來的細菌, 按革蘭氏染色特點和細菌的形態分類, 再次接種於普通鮮血瓊脂培養基上培養純化, 純培養後鏡檢無雜菌者保存於斜面保菌培養基中, 經37℃培養8～ 24 h, 再置於4℃冰箱保存。以備生化鑑定。
3.細菌的生化鑑定
主要的生化試驗有革蘭氏染色、溶血試驗、各種糖發酵試驗、過氧化氫試驗、甲基紅試驗、V 2P 試驗、吲哚試驗、硫化氫試驗、明膠液化試驗、尿素酶試驗、石蕊牛乳試驗和枸櫞酸鹽試驗。
試驗結果
1.分離培養的結果 肉湯均勻渾濁, 有絮狀沉澱,液面有菌環。在普通瓊脂上培養可見圓形、稍隆起、表面光滑、邊緣整齊、無色或接近灰白色的菌落。血瓊脂平板上生長形成圓形凸起、光滑、濕潤、半透明、灰白色菌落, 直徑為2～ 3 mm。在麥康凱瓊脂上形成紅色菌落。
2.生化鑑定的結果 經革蘭氏染色可見革蘭氏陰性的短桿菌, 兩端鈍圓。散在或成對存在。C型溶血,無溶血環。生化鑑定的結果見表1。
3.細菌鑑定結果 經分離培養和生化鑑定, 查細菌鑑定手冊第8 版確認, 分離出的是埃希氏大腸桿菌。經分離培養和生化鑑定, 5 種病料結果均為埃希氏大腸桿菌。
討論
1.細菌的致病性和來源
大腸桿菌是人和溫血動物腸道正常菌群, 隨糞便排出體外, 也是環境常在菌。試驗所分離出的埃希氏大腸桿菌毒力很弱, 是一種條件致病菌, 受到某些誘發因素的刺激下, 就可能導致宿主內環境發生異常, 引起發病。正常生理情況下犬陰道內也存在這些常在菌, 從陰道正常菌群中分離出大腸桿菌和子宮內分離出的大腸桿菌屬同種類型。在發情前期和發情期細菌通過子宮頸進入子宮,造成污染, 是一種正常現象。由於發情期時犬的子宮頸處於開放狀態, 此時陰道的常在菌有很大機會進入子宮, 如果此時子宮內膜已經處於增生的狀態, 則入侵的細菌很可能會導致子宮內的炎症過程, 促進子宮積液的發生。
2.細菌與子宮積液的關係
等均用機械劃傷的方法成功造成黃體期子宮內膜的局部增生, 將從子宮積液犬的子宮中分離出的埃希氏大腸桿菌接種到這些犬的子宮腔內, 結果有很大比例的犬可以發展為子宮積液。因此他們斷定, 一定存在某些與子宮內膜創傷或刺激有關的因素, 與細菌共同作用, 產生了引發子宮積液的適宜刺激。現已證明這種影響因素就是孕酮和雌激素。顯然長期或反覆因孕酮和雌激素刺激引起子宮病理性變化是子宮積液發生的主要機制和初始原因。雖然細菌尤其大腸桿菌是子宮積液中經常分離到的細菌, 但其不可能是發生子宮積液的初始原因, 因為正常犬子宮污染時並不會引起該病。而且子宮積液初期子宮內容物常為無菌狀態, 只有子宮內膜被某些因素如孕酮、雌激素等預處理後, 造成黃體期子宮內膜的局部增生, 子宮內膜的腺體會產生大量分泌物, 才有利於細菌的入侵和大量繁殖, 然後細菌才分泌毒素並刺激子宮內膜, 促進子宮積液量的增加而引起疾病的進一步發展。
3.只分離出大腸桿菌的可能原因
一是子宮的防禦機制, 在疾病的初期細菌侵入子宮後, 機體釋放各種激素如雌激素, 它可提高白細胞向子宮腔移動的速率, 增加子宮腔殺菌的能力, 這樣某些細菌就可能被子宮的一些防禦機制所清除。二是子宮中的無菌環境可能與抗生素的應用有關, 因為病犬發病後採用過抗生素治療, 降低了細菌的檢出率。而子宮內膜和子宮肌層內存在特異性的大腸桿菌受體, 從理論上增加了其在子宮內建群的可能性, 所以最終只有大腸桿菌被檢出。
4.發病的主要原因
由試驗結果看, 5隻病犬的病料經分離鑑定均為大腸桿菌, 而大腸桿菌又不能直接引發子宮積液, 由此看子宮積液的主要發病機制還應是長期或反覆孕酮刺激和雌激素的共同作用的結果。細菌作用只不過是一種繼發因素。
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