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現代分子生物學技術在食品、藥品微生物檢測中的應用

2023年10月14日

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  [摘要]近年來隨著時代的快速發展,食品藥品行業也得到快速發展,但食品藥品安全問題層出不窮,引起了社會各界人士的關注和重視。隨著科技進步與發展,現代分子生物學技術也在相關行業中得到應用,在微生物檢測和分類中的應用明顯提高了檢測技術水平,通過微生物檢測可以獲得精準結果,節省時間,有效提高工作效率。本文就對現代分子生物學技術在食品藥品微生物檢測中的應用進行探討與分析。
  [關鍵詞]現代分子生物學技術;食品藥品;微生物檢測;應用
  中圖分類號:S803文獻標識碼:A文章編號:1009-914X(2018)24-0163-01
  隨著食品行業與藥品行業的快速發展,食品藥品安全問題與質量問題對人們的生命健康及安全有著密切的聯繫,並產生直接的影響,但從目前情況來看,食品藥品安全問題不斷發生,主要是由於當前的食品藥品檢測技術較為落後,難以滿足食品藥品行業發展的要求,因此對於新食品藥品檢測技術的研究與探討是具有重要的現實意義的。而現代分子生物學技術主要是由多種技術所共同組成的,根據行業專家學者對於DNA分子雙螺旋結構進行不斷深入探索,並對基因與染色體研究發展成熟,使傳統食品藥品檢測技術的缺點得到克服,在食品藥品微生物檢測中得到廣泛應用,為食品藥品安全及質量提供充足的保障。
  一、現代分子生物學技術分析
  (一)聚合酶鏈式反應技術
  聚合酶鏈式反應技術,即PCR,從實質上來看可以將其作為DNA的一種體外複製,該技術主要是將大量微量DNA擴增,並根據染色體和基因來對微生物基因型加以明確,因此在微生物檢測中得到廣泛應用。聚合酶鏈式反應技術主要是在體外對特定DNA分子片段進行高速擴增,並在滿足外界高溫等條件下,對雙鏈DNA進行解旋,使其變為單鏈,並降低其溫度,在DNA聚合酶作用下將其和引物互補配對,從而形成新的DNA雙鏈結構。合成新雙鏈結構可以將其作為繼續擴增模板,並給予合適溫度與環境,進行無限擴增。該技術重點是嚴格控制其溫度,PCR技術雖然比傳統的食品藥品微生物檢測方法靈敏度較高,且檢測時間短,特異性較強,但同時也存在諸多問題,該技術合成引物對於技術性要求較高,PCR技術的靈敏度較高,在檢測過程中會出現將微量外源污染DNA作為有害微生物,從而產生假陽性。
  (二)基因晶片技術
  基因晶片技術是將固定標記與已知序列DNA探針進行雜交,並進行核苷酸測序,對樣品進行分析與檢測。在這一技術中還包括有計算機學科、物理學科與化學學科等,是一種高度交叉的技術,在微生物檢測、新基因尋找和臨床藥物檢測和臨床診斷中得到廣泛應用。該技術同時具有自動性、多樣性、微型化等特點,在同一晶片中對於多種類生物分子進行檢測,當前基因晶片技術在食品與藥品檢測中還沒有得到應用,而在基因表達分析與蛋白質檢測中取得了顯著的成效。
  (三)變性梯度凝膠電泳技術
  變性梯度凝膠電泳技術主要是DNA在不同濃度變性劑中會產生不同的連接程度,所產生的電泳遷移率也會不同,而根據不同的電泳遷移率鹼基分離所組成的DNA片段也會不同,該項技術與DNA測序技術可以聯合使用,從而對食品藥品菌落組成成分進行分析。變性梯度凝膠電泳技術在對微生物檢測中可以對微生物種群動態活性與多樣性進行探究,為人類對自然生物群落的研究指明了方向,但不可避免的是該項技術仍然存在一定的局限性,當前仍不能檢測出微生物代謝活性與數量。
  二、現代分子生物學技術在食品藥品微生物檢測中的應用
  (一)聚合酶鏈式反應技術在食品藥品微生物檢測中的應用
  1.在轉基因食品檢測中的應用
  現階段轉基因食品大量出現在人們的生活中,而這些食品的出現是基於現代基因技術發展而來的,在轉基因食品中含有大量新的DNA和蛋白質,轉基因食品安全問題一直是人們密切關注和重視的問題,只有加強對轉基因視頻的專業檢測,才能確保消費者可以大膽、放心購買。當前對於轉基因食品檢測方法主要有蛋白質檢測法、PCR檢測法和蛋白酶活性檢測法等,其中聚合酶鏈式反應技術是所有檢測方法中最為安全的,與其他兩種方法相比具有不同的優勢,由於酶和蛋白質主要成分為蛋白質,蛋白質的易變性失活,因此在專業檢驗中並不適用。PCR技術作為一種具有較高靈活性、特異性和敏感性的技術,可以對於低含量轉基因成分進行檢測。而螢光定量技術屬於新型PCR技術,在該項技術中加入螢光基因,在PCR檢測過程中應用了螢光信號,對於傳統PCR檢測方法中的假陽性問題與準確度低的問題成功解決。
  2.在致病食品微生物檢測中的應用
  在致病食品中的微生物主要包括有肉毒梭菌、弧菌、沙門氏菌和單核細胞增生性李斯特氏菌,在對這類致病微生物檢測中採用PCR技術具有較高的敏感性和迅速性特點,這也是傳統檢測技術所無法解決的問題。在牛奶等食品中單核細胞增生性李斯特氏菌是主要病原菌,在對食品中DNA提取中採用裂解法來進行提取,用半套式PCR技術進行檢測,通過特殊合成引物來進行特異性擴增,對於其他菌類不會產生反應。與傳統PCR技術相比較而言,半套式PCR檢測技術的敏感性較高,檢測時間較短,通常只需5、6個小時。而肉毒梭菌是肉類食品中常見的致病菌,在檢測過程中傳統的檢測技術對肉毒梭菌進行提取需要多天,對肉毒神經黴素的檢測,選擇相應的基因序列,通過合成特定引物來對A、B、E等多種毒素基因進行複製,加快檢測速度,但由於PCR技術只能檢測出是否存在肉毒梭菌,但無法對於黴素與菌是否並存狀態進行判斷。因此在對肉毒梭菌檢測中PCR技術只能作為一種參考。
  3.在藥品檢測中的應用
  在藥品微生物檢測中主要採用的是PCR實時螢光技術,與傳統檢測技術相比更加準確、迅速的對藥品中金黃色葡萄球菌進行檢測。
  (二)變性梯度凝膠電泳技術的應用
  在對菌落變化和食源性致病菌檢測中變形地圖凝膠技術得到廣泛應用,通過對變形梯度凝膠技術與聚合酶鏈式反應技術進行優化,並與DNA測序技術相結合,對於不同地區中川穹真菌差異性進行分析,從而得出川穹種群系統結構多樣性的特點。
  結語
  綜上所述,目前人們在日常生活中食品藥品安全問題是最受關注的一個話題,為確保食品藥品安全,就要加強對食品藥品的安全檢測,對其中所含有的致病微生物進行快速、準確的檢測。雖然傳統檢測技術可以滿足其基本檢測條件,但檢測效率較低,且成本高,如將其和其他檢測技術相結合,則可以有效克服其自身的問題,這也是未來食品藥品檢測的主要手段。
  作者:趙嘉玲等

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