作者：盧綺雯，李堅，蕭鵬，謝艷婷
【摘要】 目的 測定廣東土牛膝中腺苷的含量。 方法 採用反相高效液相色譜法，色譜柱：DiamonsilTM C18柱，流動相：甲醇磷酸鹽緩衝溶液（體積比12∶88），流速：1. 0 mL·min-1 ，檢測波長260 nm，柱溫30 ℃。結果 腺苷的平均回收率為99.5%，RSD值為1.69%;方法精密度試驗RSD值為1.15%(n=6)。結論 該法可用於廣東土牛膝中腺苷的含量測定。
【關鍵詞】 廣東土牛膝；腺苷；HPLC；含量測定
Abstract:Objective To determine the content of adenosine in Radix Eupalorri Chinense Linn by RPHPLC. Methods Samples were analyzed on a DiamonsilTM C18 column（250 mm×4.6 mm，5 μm） using CH3OHNaH2PO4·Na2HPO4(12∶88)as mobile phase. The flow rate was 1.0 mL·min-1 and the detection wavelength 260 nm. Results The method exhibited good linearity from 0.0396 to 0.6336 μg. The average recovery for adenosine was 99.5% and RSD 1.69% (n=6).Conclusion The method could be used to determine adenosine content in Radix Eupalorri Chinense Linn.
Key words:Radix Eupalorri chinense Linn; adenosine; RPHPLC
廣東土牛膝（Radix Eupalorri Chinense Linn）為菊科植物華澤蘭的乾燥根及根莖，廣東土牛膝資源豐富，分布較廣，在民間沿用 歷史 悠久，具有清熱解毒、涼血利咽、抗炎鎮痛的功效［1,2］，臨床上常用於 治療 各種咽喉炎、扁桃腺炎等。為評價廣東土牛膝的內在質量，本文以腺苷為指標成分［3］，建立了廣東土牛膝中腺苷含量測定的高效液相色譜法，該法具有分離效果好，簡便、準確等優點，可用於該藥材的初步質量控制。
1儀器和試藥
1.1儀器
日本島津高效液相色譜儀 (LC10ATvp溶劑輸送泵，SPD10Avp紫外可見檢測器，CTO10Asp柱溫箱)，HW2000色譜工作站（南京千譜軟體公司）。
1.2藥材來源及處理
土牛膝樣品（批號20051102，東莞國藥集團中藥飲片有限公司，產地廣東；批號20060109，東莞國藥集團中藥飲片有限公司，產地廣東；批號0500201，佛山康泰和醫藥有限公司中藥飲片加工廠，產地廣東），由廣東藥學院生藥學教研室劉基柱副教授鑑定為菊科澤蘭屬植物華澤蘭(Eupalorri chinense Linn)的根及根莖。將其粉碎，於60 ℃下乾燥4 ｈ，置乾燥器內備用。
1.3藥品與試劑
腺苷對照品（ 中國 藥品生物製品檢定所提供，批號879-200202，供含量測定用）；甲醇為色譜純，水為雙蒸水，磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉均為 分析 純。
2實驗部分
2.1溶液的製備
2.1.1供試品溶液
取本品粉末（過3號篩）約1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%（體積分數）的甲醇20 mL，稱定重量，超聲處理45 min，放冷，再稱定重量，用50%（體積分數）甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續濾液即得。
2.1.2對照品溶液
精密稱取腺苷對照品9.90 mg，置50 mL量瓶中，加50%（體積分數）的甲醇適量，振搖使溶解，再加50%（體積分數）的甲醇稀釋至刻度，搖勻，得濃度為198 μg· mL-1的腺苷對照品貯備液。
2.2色譜條件及系統用性試驗
色譜柱：DiamonsilTM(鑽石) C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm，迪馬公司）；流動相：甲醇磷酸鹽緩衝溶液［取0.01 mol·L-1磷酸二氫鈉68.5 mL與0.01 mol·L-1磷酸氫二納31.5 mL混合（pH＝6.5）］ （體積比12∶88）；流速：1.0 mL·min-1，檢測波長：260 nm；柱溫：30 ℃。分別取對照品溶液（腺苷濃度為7.92 μg· mL-1），供試品溶液20 μL注入色譜儀，按上述色譜條件，記錄色譜圖（圖1,2）。腺苷和樣品中相鄰色譜峰的分離度大於1.5； 理論 塔板數以腺苷峰 計算 不低於3 000；保留時間約為17.40 min。
轉貼於論文聯盟 http://www.lwlm.com
【摘要】 目的 測定廣東土牛膝中腺苷的含量。 方法 採用反相高效液相色譜法，色譜柱：DiamonsilTM C18柱，流動相：甲醇磷酸鹽緩衝溶液（體積比12∶88），流速：1. 0 mL·min-1 ，檢測波長260 nm，柱溫30 ℃。結果 腺苷的平均回收率為99.5%，RSD值為1.69%;方法精密度試驗RSD值為1.15%(n=6)。結論 該法可用於廣東土牛膝中腺苷的含量測定。
【關鍵詞】 廣東土牛膝；腺苷；HPLC；含量測定
Abstract:Objective To determine the content of adenosine in Radix Eupalorri Chinense Linn by RPHPLC. Methods Samples were analyzed on a DiamonsilTM C18 column（250 mm×4.6 mm，5 μm） using CH3OHNaH2PO4·Na2HPO4(12∶88)as mobile phase. The flow rate was 1.0 mL·min-1 and the detection wavelength 260 nm. Results The method exhibited good linearity from 0.0396 to 0.6336 μg. The average recovery for adenosine was 99.5% and RSD 1.69% (n=6).Conclusion The method could be used to determine adenosine content in Radix Eupalorri Chinense Linn.
Key words:Radix Eupalorri chinense Linn; adenosine; RPHPLC
廣東土牛膝（Radix Eupalorri Chinense Linn）為菊科植物華澤蘭的乾燥根及根莖，廣東土牛膝資源豐富，分布較廣，在民間沿用 歷史 悠久，具有清熱解毒、涼血利咽、抗炎鎮痛的功效［1,2］，臨床上常用於 治療 各種咽喉炎、扁桃腺炎等。為評價廣東土牛膝的內在質量，本文以腺苷為指標成分［3］，建立了廣東土牛膝中腺苷含量測定的高效液相色譜法，該法具有分離效果好，簡便、準確等優點，可用於該藥材的初步質量控制。
1儀器和試藥
1.1儀器
日本島津高效液相色譜儀 (LC10ATvp溶劑輸送泵，SPD10Avp紫外可見檢測器，CTO10Asp柱溫箱)，HW2000色譜工作站（南京千譜軟體公司）。
1.2藥材來源及處理
土牛膝樣品（批號20051102，東莞國藥集團中藥飲片有限公司，產地廣東；批號20060109，東莞國藥集團中藥飲片有限公司，產地廣東；批號0500201，佛山康泰和醫藥有限公司中藥飲片加工廠，產地廣東），由廣東藥學院生藥學教研室劉基柱副教授鑑定為菊科澤蘭屬植物華澤蘭(Eupalorri chinense Linn)的根及根莖。將其粉碎，於60 ℃下乾燥4 ｈ，置乾燥器內備用。
1.3藥品與試劑
腺苷對照品（ 中國 藥品生物製品檢定所提供，批號879-200202，供含量測定用）；甲醇為色譜純，水為雙蒸水，磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉均為 分析 純。
2實驗部分
2.1溶液的製備
2.1.1供試品溶液
取本品粉末（過3號篩）約1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%（體積分數）的甲醇20 mL，稱定重量，超聲處理45 min，放冷，再稱定重量，用50%（體積分數）甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續濾液即得。
2.1.2對照品溶液
精密稱取腺苷對照品9.90 mg，置50 mL量瓶中，加50%（體積分數）的甲醇適量，振搖使溶解，再加50%（體積分數）的甲醇稀釋至刻度，搖勻，得濃度為198 μg· mL-1的腺苷對照品貯備液。
2.2色譜條件及系統用性試驗
色譜柱：DiamonsilTM(鑽石) C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm，迪馬公司）；流動相：甲醇磷酸鹽緩衝溶液［取0.01 mol·L-1磷酸二氫鈉68.5 mL與0.01 mol·L-1磷酸氫二納31.5 mL混合（pH＝6.5）］ （體積比12∶88）；流速：1.0 mL·min-1，檢測波長：260 nm；柱溫：30 ℃。分別取對照品溶液（腺苷濃度為7.92 μg· mL-1），供試品溶液20 μL注入色譜儀，按上述色譜條件，記錄色譜圖（圖1,2）。腺苷和樣品中相鄰色譜峰的分離度大於1.5； 理論 塔板數以腺苷峰 計算 不低於3 000；保留時間約為17.40 min。
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