【摘要】
目的研究黃芩中的黃酮提取方法和抗菌活性。方法利用超聲波技術通過正交實驗提取黃芩中的黃酮，杯碟法對其進行抗菌活性的研究。結果超聲波最佳的提取條件為功率235 W，60%乙醇，料液比為1∶20，提取時間為9 min，黃酮提取率為10.35%。該提取液對金色葡萄球菌、枯草桿菌、大腸桿菌、黑麴黴、青黴都有明顯的抑菌效果，最低抑菌濃度分別為：1.0，2.0，1.0，0.5，1.0 mg·ml-1；最小殺菌濃度為：1.0，2.0，2.0，2.0，1.0 mg·ml-1。結論超聲波技術是提取黃芩黃酮的高效方法，黃芩具有較強的抗菌活性。
【關鍵詞】 超聲波提取 黃芩 黃酮 抑菌活性
黃芩Scutellaria baicalensis Georgi為常用中藥之一，是唇形科植物黃芩的乾燥根［1］。其有效成分主要為黃酮類化合物。據報道，黃芩黃酮是一類生物活性較強的天然產物，具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗氧化、抗腫瘤、降血壓等作用［2，3］。超聲波具有加速藥材中有效成分溶解、縮短提取時間、提高有效成分的提取率等優點［4］，因此，本文通過正交實驗探討超聲波提取黃芩黃酮的最佳提取條件，為大規模高效生產黃芩黃酮提供了有力的理論依據。黃芩黃酮的體外抗菌的研究較少，本研究將最佳提取條件下的黃酮提取液對一些細菌和真菌進行了抑菌實驗，旨在開發一種天然的抑菌劑，並為臨床用藥提供理論依據。
1 材料
黃芩購於湖南長沙康爾佳藥店，粉碎過40目篩，80℃烘乾備用。蘆丁對照品購於 中國 上海醫藥化學試劑公司；供試菌種金色葡萄球菌、枯草桿菌、大腸桿菌、黑麴黴、青黴由本實驗室保存並培養。
2 方法
2.1 提取方法
超聲波提取法：稱取黃芩粉5.0 g，採用L9（34）按表1方法進行超聲波提取，提取液過濾，合併濾液，定容至100 ml，搖勻備用。表1 因素水平（略）
對比實驗：①煎煮法：稱取黃芩粉5.0 g，加水100 ml，浸泡30 min，煮沸後，文火煎60 min，過濾，共煎煮兩次，合併濾液，定容至100 ml，搖勻備用。②連續回流提取法：稱取黃芩粉5.0 g，加60%乙醇100 ml，水浴回流90 min，過濾，共提取兩次，合併濾液，定容至100 ml，搖勻備用。
2.2 標準曲線的製作
稱取在105℃下乾燥恆重的蘆丁對照品10 mg，用95%的乙醇溶解，搖勻，定容至10 ml使之成為濃度為1 mg·ml-1的蘆丁標準品溶液，作為儲備液備用。量取上述溶液0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6 ml，分別加水至3 ml，加5%的亞硝酸鈉溶液0.5 ml，放置6 min，加10%的硝酸鋁溶液0.5 ml，搖勻，放置6 min，後加5%的氫氧化鈉溶液2.5 ml，混勻，放置15 min後蒸餾水定容10 ml，用紫外分光光度計在510 nm處測其吸光度，得到回歸方程為：A＝9.933 9C－0.001 73（R2=0.997 5）。
2.3 黃芩黃酮的抑菌實驗採用杯碟法測定
其抑菌作用，取濃度106～107CFU/ml的各種待試菌懸液0.2 ml，與相應滅菌培養基15 ml混合製成混菌平板，凝固後，在平板上等距離放入4個滅菌牛津杯，每個菌設置3個重複，一個無菌生理鹽水為對照，取0.1 ml黃酮提取液加入牛津杯中，細菌37℃，真菌28℃培養18～24 h後，移去牛津杯，量取抑菌圈直徑，直徑越大抗菌活性越強。
目的研究黃芩中的黃酮提取方法和抗菌活性。方法利用超聲波技術通過正交實驗提取黃芩中的黃酮，杯碟法對其進行抗菌活性的研究。結果超聲波最佳的提取條件為功率235 W，60%乙醇，料液比為1∶20，提取時間為9 min，黃酮提取率為10.35%。該提取液對金色葡萄球菌、枯草桿菌、大腸桿菌、黑麴黴、青黴都有明顯的抑菌效果，最低抑菌濃度分別為：1.0，2.0，1.0，0.5，1.0 mg·ml-1；最小殺菌濃度為：1.0，2.0，2.0，2.0，1.0 mg·ml-1。結論超聲波技術是提取黃芩黃酮的高效方法，黃芩具有較強的抗菌活性。
【關鍵詞】 超聲波提取 黃芩 黃酮 抑菌活性
黃芩Scutellaria baicalensis Georgi為常用中藥之一，是唇形科植物黃芩的乾燥根［1］。其有效成分主要為黃酮類化合物。據報道，黃芩黃酮是一類生物活性較強的天然產物，具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗氧化、抗腫瘤、降血壓等作用［2，3］。超聲波具有加速藥材中有效成分溶解、縮短提取時間、提高有效成分的提取率等優點［4］，因此，本文通過正交實驗探討超聲波提取黃芩黃酮的最佳提取條件，為大規模高效生產黃芩黃酮提供了有力的理論依據。黃芩黃酮的體外抗菌的研究較少，本研究將最佳提取條件下的黃酮提取液對一些細菌和真菌進行了抑菌實驗，旨在開發一種天然的抑菌劑，並為臨床用藥提供理論依據。
1 材料
黃芩購於湖南長沙康爾佳藥店，粉碎過40目篩，80℃烘乾備用。蘆丁對照品購於 中國 上海醫藥化學試劑公司；供試菌種金色葡萄球菌、枯草桿菌、大腸桿菌、黑麴黴、青黴由本實驗室保存並培養。
2 方法
2.1 提取方法
超聲波提取法：稱取黃芩粉5.0 g，採用L9（34）按表1方法進行超聲波提取，提取液過濾，合併濾液，定容至100 ml，搖勻備用。表1 因素水平（略）
對比實驗：①煎煮法：稱取黃芩粉5.0 g，加水100 ml，浸泡30 min，煮沸後，文火煎60 min，過濾，共煎煮兩次，合併濾液，定容至100 ml，搖勻備用。②連續回流提取法：稱取黃芩粉5.0 g，加60%乙醇100 ml，水浴回流90 min，過濾，共提取兩次，合併濾液，定容至100 ml，搖勻備用。
2.2 標準曲線的製作
稱取在105℃下乾燥恆重的蘆丁對照品10 mg，用95%的乙醇溶解，搖勻，定容至10 ml使之成為濃度為1 mg·ml-1的蘆丁標準品溶液，作為儲備液備用。量取上述溶液0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6 ml，分別加水至3 ml，加5%的亞硝酸鈉溶液0.5 ml，放置6 min，加10%的硝酸鋁溶液0.5 ml，搖勻，放置6 min，後加5%的氫氧化鈉溶液2.5 ml，混勻，放置15 min後蒸餾水定容10 ml，用紫外分光光度計在510 nm處測其吸光度，得到回歸方程為：A＝9.933 9C－0.001 73（R2=0.997 5）。
2.3 黃芩黃酮的抑菌實驗採用杯碟法測定
其抑菌作用，取濃度106～107CFU/ml的各種待試菌懸液0.2 ml，與相應滅菌培養基15 ml混合製成混菌平板，凝固後，在平板上等距離放入4個滅菌牛津杯，每個菌設置3個重複，一個無菌生理鹽水為對照，取0.1 ml黃酮提取液加入牛津杯中，細菌37℃，真菌28℃培養18～24 h後，移去牛津杯，量取抑菌圈直徑，直徑越大抗菌活性越強。
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