作者：代晶 朱軍 趙淼 楊萬清
【摘要】
目的 建立測定維生素E(VitE)含量的高效液相色譜法。 方法 採用Shimadzu C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以甲醇為流動相；檢測波長為284 nm，流速1.5 ml·min-1。結果 維生素E在0.125～5.0 mg·ml-1範圍內，峰面積與其濃度線性關係良好（r＝0.999 9），高、中、低3種濃度的平均加樣回收率為101.4％～102.7%，RSD為0.46％～0.71%，最低檢測限為0.4μg·ml-1。結論 本法準確、簡便、快速，適用於維生素E片的含量測定。
【關鍵詞】 維生素E；高效液相色譜法；含量測定
Abstract：Objective To establish a RP-HPLC for determination of Vitamin E.Method Vitamin E was determinated on HPLC instrument fixed a Shimadzu C18 column (4.6mm×250mm，5μm) with UV detection at 284nm, and the mobile phase was MeOH, the flow rate was 1.5ml·min-1.Results The calibration curve was linear(r=0.9999)within the range of 0.125～5.0 mg·ml-1 for Vitamin E, the average recovery rates were from 101.4% to 102.7% for three different levels of the amount of Vitamin E,RSD was from 0.46％ to 0.71%,and LOD was 0.4μg·mL-1.Conclusion This method was simple，quick，accurate and effective for determination of Vitamin E.It was suitable for the quality control for tabella Vitamin E.
Key words:Vitamin E;HPLC;determination
維生素E又稱生育酚，是一種脂溶性物質，在人體內主要參與生育功能、肌肉代謝等過程，具有強大的抗氧化性，是人體必須的微量元素之一。 目前 VitE的主要 分析 方法包括化學發光抑製法［1］、UV法［2］、GC法［3］、螢光法［4］和HPLC法［5］等。在這些方法中化學發光法儀器要求特殊，而螢光法、UV法、GC法易受到輔料干擾。本文採用反相HPLC法測定VitE片含量，方法準確，不受其他成分干擾，取得比較滿意的效果。
1 儀器及試劑
SPD-M10A高效液相色譜儀（日本島津）、LC-10AT 紫外檢測器（日本島津）；甲醇（分析純，山東省禹王實業總公司禹城化工廠）、無水乙醇（分析純，瀋陽正信高 科技 研究 所試劑部）、維生素E醋酸酯對照品（日本信越製藥株式會社）、維生素E片（瀋陽藥科大學藥分教研室提供）。
2 色譜條件與系統適用性試驗
色譜柱：Shimadzu C18柱（5 μm,4.6 mm×250 mm）日本島津公司；流動相：甲醇；流速：1.5 ml/min; 進樣體積：20 μl；檢測波長：284 nm；柱溫：35 ℃； 理論 塔板數按維生素E峰 計算 應不低於5 000。
3 溶液的配製
3.1 對照品溶液製備 取VitE對照品適量，精密稱定，加無水乙醇製成每1ml含VitE 1.5 mg的溶液，作為對照品溶液。
3.2 供試品溶液配製 取VitE片10片，精密稱定、研細。精密稱取細粉適量加無水乙醇製成每1ml中含VitE 1.5 mg的溶液，搖勻。過濾，棄去初濾液，取續濾液作為含量測定的供試品溶液。
4 方法的專屬性考察
在上述色譜條件下, 分別取對照品溶液、供試品溶液及流動相20 μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液的主峰與對照品溶液的主峰位置相同（約15 min），空白輔料在VitE峰位置處無色譜峰，VitE峰與相鄰雜質峰的分離度符合要求。試驗表明該方法具有良好的專屬性，見圖1。
5 方法學考察
5.1 線性關係及檢測限
A.blank adfuvant solutionB.ControlC.Sample
圖1 維生素E HPLC色譜圖
Fig.1 HPLC chromatogram of Vitamin E
取VitE對照品適量，精密稱定，用無水乙醇製備成含VitE 0.125、0.25、0.50、1.0、2.0、5.0 mg·ml-1的溶液，分別精密吸取20(l注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以峰面積Y對維生素E濃度X進行線性回歸，得回歸方程為：y=3 149 247x+4781.6 r=0.999 9(n=6)。 VitE濃度與色譜峰面積在0.125～5.0 mg·ml-1範圍內線性關係良好（r＝0.999 9），檢測限為0.4(g·ml-1（S/N=3）。
【摘要】
目的 建立測定維生素E(VitE)含量的高效液相色譜法。 方法 採用Shimadzu C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以甲醇為流動相；檢測波長為284 nm，流速1.5 ml·min-1。結果 維生素E在0.125～5.0 mg·ml-1範圍內，峰面積與其濃度線性關係良好（r＝0.999 9），高、中、低3種濃度的平均加樣回收率為101.4％～102.7%，RSD為0.46％～0.71%，最低檢測限為0.4μg·ml-1。結論 本法準確、簡便、快速，適用於維生素E片的含量測定。
【關鍵詞】 維生素E；高效液相色譜法；含量測定
Abstract：Objective To establish a RP-HPLC for determination of Vitamin E.Method Vitamin E was determinated on HPLC instrument fixed a Shimadzu C18 column (4.6mm×250mm，5μm) with UV detection at 284nm, and the mobile phase was MeOH, the flow rate was 1.5ml·min-1.Results The calibration curve was linear(r=0.9999)within the range of 0.125～5.0 mg·ml-1 for Vitamin E, the average recovery rates were from 101.4% to 102.7% for three different levels of the amount of Vitamin E,RSD was from 0.46％ to 0.71%,and LOD was 0.4μg·mL-1.Conclusion This method was simple，quick，accurate and effective for determination of Vitamin E.It was suitable for the quality control for tabella Vitamin E.
Key words:Vitamin E;HPLC;determination
維生素E又稱生育酚，是一種脂溶性物質，在人體內主要參與生育功能、肌肉代謝等過程，具有強大的抗氧化性，是人體必須的微量元素之一。 目前 VitE的主要 分析 方法包括化學發光抑製法［1］、UV法［2］、GC法［3］、螢光法［4］和HPLC法［5］等。在這些方法中化學發光法儀器要求特殊，而螢光法、UV法、GC法易受到輔料干擾。本文採用反相HPLC法測定VitE片含量，方法準確，不受其他成分干擾，取得比較滿意的效果。
1 儀器及試劑
SPD-M10A高效液相色譜儀（日本島津）、LC-10AT 紫外檢測器（日本島津）；甲醇（分析純，山東省禹王實業總公司禹城化工廠）、無水乙醇（分析純，瀋陽正信高 科技 研究 所試劑部）、維生素E醋酸酯對照品（日本信越製藥株式會社）、維生素E片（瀋陽藥科大學藥分教研室提供）。
2 色譜條件與系統適用性試驗
色譜柱：Shimadzu C18柱（5 μm,4.6 mm×250 mm）日本島津公司；流動相：甲醇；流速：1.5 ml/min; 進樣體積：20 μl；檢測波長：284 nm；柱溫：35 ℃； 理論 塔板數按維生素E峰 計算 應不低於5 000。
3 溶液的配製
3.1 對照品溶液製備 取VitE對照品適量，精密稱定，加無水乙醇製成每1ml含VitE 1.5 mg的溶液，作為對照品溶液。
3.2 供試品溶液配製 取VitE片10片，精密稱定、研細。精密稱取細粉適量加無水乙醇製成每1ml中含VitE 1.5 mg的溶液，搖勻。過濾，棄去初濾液，取續濾液作為含量測定的供試品溶液。
4 方法的專屬性考察
在上述色譜條件下, 分別取對照品溶液、供試品溶液及流動相20 μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液的主峰與對照品溶液的主峰位置相同（約15 min），空白輔料在VitE峰位置處無色譜峰，VitE峰與相鄰雜質峰的分離度符合要求。試驗表明該方法具有良好的專屬性，見圖1。
5 方法學考察
5.1 線性關係及檢測限
A.blank adfuvant solutionB.ControlC.Sample
圖1 維生素E HPLC色譜圖
Fig.1 HPLC chromatogram of Vitamin E
取VitE對照品適量，精密稱定，用無水乙醇製備成含VitE 0.125、0.25、0.50、1.0、2.0、5.0 mg·ml-1的溶液，分別精密吸取20(l注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以峰面積Y對維生素E濃度X進行線性回歸，得回歸方程為：y=3 149 247x+4781.6 r=0.999 9(n=6)。 VitE濃度與色譜峰面積在0.125～5.0 mg·ml-1範圍內線性關係良好（r＝0.999 9），檢測限為0.4(g·ml-1（S/N=3）。
收藏