作者：烏日娜，許良，孫福祥，王志民，娜仁花，李大力，段雲志
【摘要】
目的研究蒙成藥沏其日甘-5的抗氧化作用。方法通過建立氧自由基（O-2·），羥自由基（·OH），脂質過氧化物（LPO）生成體系研究和探討沏其日甘-5對自由基的清除和抑制作用。結果沏其日甘-5對O-2·的清除率（S%）是86.0，抑制率（I%）是82.9，對·OH的S%是84.1，I%是78.9。對LPO的生成也有一定抑制作用。結論沏其日甘-5在體外有很強清除和抑制自由基作用,是良好抗氧化劑。
【關鍵詞】 氧自由基； 羥自由基； 脂質過氧化物； 沏其日甘-5
Abstract：ObjectiveTo evaluate the scavenging and inhibitory effects of Qiqirigan-5 extract on free radicals. MethodsThe O-2·, ·OH, and LPO formation systems were established, to evaluate the scavenging and inhibitory effects of the extract.Results The scavenging and inhibiting effects of the medicineon free radical O-2 · were 86.0% and 82.9%, respectively; and the rates on ·OH were were 84.1% and 78.9%, respectively. In addition, the medicine also has the above effects on the free radical LPO to some extent. ConclusionMongolian medicine Qiqirigan-5 has good scavenging and inhibitory effects on free radicals.It is one of good antioxidants.
Key words：Oxygen free radical; Malondialdehyde; Hydroxyl radical; The extract of Qiqirigan-5
沏其日甘-5是蒙醫常用藥，主要功能是清熱化痰，止咳。主治肺熱痰多，久咳，喘促。主要成分是沙棘、木香、梔子、甘草、白葡萄乾組成。臨床上用予 治療 肺部疾患，對缺氧性疾患療效顯著。本實驗對其抗氧化作用進行研究。［1］
1 材料與方法
1.1 藥品和試劑沏其日甘-5由內蒙古蒙藥股份有限公司生產，批號060810 1231。符合蒙成藥製劑通則標準。經蒙藥師鑑定為正品。抗壞血酸（Vit.C）,硫酸銅（CuSO4），硫脲，蛋氨酸（Net），核黃素（Vit.B2），四硝基唑蘭（NBT），均為國產生化試劑。核糖核酸（DR），四乙氧基丙烷（TEP），硫代巴比妥酸（TBA）均為Sigma公司提供。
1.2 沏其日甘-5提取液的製備取沏其日甘-5，烘乾。稱其一定量，在60～100℃溫度下，用10倍量的蒸餾水提取2次，提取時間為120min/次，將提取液合併過濾。水定容至100ml 計算 出含量（μg/L）冰箱保存備用。
1.3 羥自由基（·OH）生成體系的建立終體積為1.5 ml，其中磷酸鹽緩衝液PB（pH 7.4）1.05 ml，1 mmol/L Vit.C 0.15 ml，1 mmol/L CuSO4 0.15 ml，1 mmol/L Cyt.C 0.15 ml，不同體積的沏其日甘-5提取液。標準對照加 0.5 mmol/L 硫脲10 μl。25℃水溫25 min。於紫外分光光度計上，550 nm處讀取光密度（OD）值。由Vit.C，PB，Cyt.C組成的體系的OD值為Cyt.C基礎量（A1），在上述體系中加CuSO4的OD值為·OH氧化後剩餘Cyt.C的量（A2），A1-A2為·OH氧化掉Cyt.C的量，可稱·OH的生成量（C1）。上述體系加沏其日甘-5提取液後OD值（A3），A1-A3為經沏其日甘-5提取液作用後的·OH的量（C2），C1- C2/ C1×100%即為清除率（S%）［2］。
1.4 O-2自由基生成（VB2-Met-NBT）體系的建立利用VB2光照後產生O2-·，使NBT變色的原理。取Met-NBT溶液3.8 ml，加VB20.1 ml，不同體積的沏其日甘-5提取液混合。在40瓦日光燈下，距離35 cm，光照30 min 測定光密度（OD），用同法製備的未經光照的做空白調零，用超氧化物歧化酶（SOD）做標準對照。這就是靜態法測定清除率（S%），用動態法測定抑制率（I%）［3～4］。
1.5 脂質過氧化物（LPO）生成體系的建立根據Fenton原理，採用Fe2+/H2O2體系產生的·OH自由基，誘導DR過氧化物的生成，加入沏其日甘-5提取液後，觀察其抑制LPO的生成作用。用TBA顯色，TEP做標準，計算過氧化物（丙二醛）的生成量［5］。
【摘要】
目的研究蒙成藥沏其日甘-5的抗氧化作用。方法通過建立氧自由基（O-2·），羥自由基（·OH），脂質過氧化物（LPO）生成體系研究和探討沏其日甘-5對自由基的清除和抑制作用。結果沏其日甘-5對O-2·的清除率（S%）是86.0，抑制率（I%）是82.9，對·OH的S%是84.1，I%是78.9。對LPO的生成也有一定抑制作用。結論沏其日甘-5在體外有很強清除和抑制自由基作用,是良好抗氧化劑。
【關鍵詞】 氧自由基； 羥自由基； 脂質過氧化物； 沏其日甘-5
Abstract：ObjectiveTo evaluate the scavenging and inhibitory effects of Qiqirigan-5 extract on free radicals. MethodsThe O-2·, ·OH, and LPO formation systems were established, to evaluate the scavenging and inhibitory effects of the extract.Results The scavenging and inhibiting effects of the medicineon free radical O-2 · were 86.0% and 82.9%, respectively; and the rates on ·OH were were 84.1% and 78.9%, respectively. In addition, the medicine also has the above effects on the free radical LPO to some extent. ConclusionMongolian medicine Qiqirigan-5 has good scavenging and inhibitory effects on free radicals.It is one of good antioxidants.
Key words：Oxygen free radical; Malondialdehyde; Hydroxyl radical; The extract of Qiqirigan-5
沏其日甘-5是蒙醫常用藥，主要功能是清熱化痰，止咳。主治肺熱痰多，久咳，喘促。主要成分是沙棘、木香、梔子、甘草、白葡萄乾組成。臨床上用予 治療 肺部疾患，對缺氧性疾患療效顯著。本實驗對其抗氧化作用進行研究。［1］
1 材料與方法
1.1 藥品和試劑沏其日甘-5由內蒙古蒙藥股份有限公司生產，批號060810 1231。符合蒙成藥製劑通則標準。經蒙藥師鑑定為正品。抗壞血酸（Vit.C）,硫酸銅（CuSO4），硫脲，蛋氨酸（Net），核黃素（Vit.B2），四硝基唑蘭（NBT），均為國產生化試劑。核糖核酸（DR），四乙氧基丙烷（TEP），硫代巴比妥酸（TBA）均為Sigma公司提供。
1.2 沏其日甘-5提取液的製備取沏其日甘-5，烘乾。稱其一定量，在60～100℃溫度下，用10倍量的蒸餾水提取2次，提取時間為120min/次，將提取液合併過濾。水定容至100ml 計算 出含量（μg/L）冰箱保存備用。
1.3 羥自由基（·OH）生成體系的建立終體積為1.5 ml，其中磷酸鹽緩衝液PB（pH 7.4）1.05 ml，1 mmol/L Vit.C 0.15 ml，1 mmol/L CuSO4 0.15 ml，1 mmol/L Cyt.C 0.15 ml，不同體積的沏其日甘-5提取液。標準對照加 0.5 mmol/L 硫脲10 μl。25℃水溫25 min。於紫外分光光度計上，550 nm處讀取光密度（OD）值。由Vit.C，PB，Cyt.C組成的體系的OD值為Cyt.C基礎量（A1），在上述體系中加CuSO4的OD值為·OH氧化後剩餘Cyt.C的量（A2），A1-A2為·OH氧化掉Cyt.C的量，可稱·OH的生成量（C1）。上述體系加沏其日甘-5提取液後OD值（A3），A1-A3為經沏其日甘-5提取液作用後的·OH的量（C2），C1- C2/ C1×100%即為清除率（S%）［2］。
1.4 O-2自由基生成（VB2-Met-NBT）體系的建立利用VB2光照後產生O2-·，使NBT變色的原理。取Met-NBT溶液3.8 ml，加VB20.1 ml，不同體積的沏其日甘-5提取液混合。在40瓦日光燈下，距離35 cm，光照30 min 測定光密度（OD），用同法製備的未經光照的做空白調零，用超氧化物歧化酶（SOD）做標準對照。這就是靜態法測定清除率（S%），用動態法測定抑制率（I%）［3～4］。
1.5 脂質過氧化物（LPO）生成體系的建立根據Fenton原理，採用Fe2+/H2O2體系產生的·OH自由基，誘導DR過氧化物的生成，加入沏其日甘-5提取液後，觀察其抑制LPO的生成作用。用TBA顯色，TEP做標準，計算過氧化物（丙二醛）的生成量［5］。