王振富1，陳力2，王青妹3，寇景蓮1，吳彥2，張欣3，李夢媛3
（1.承德市水產技術推廣站，河北承德067000；2.河北省海洋與水產科學研究院，
河北秦皇島066200；3.承德市水產工作站，河北承德067000）
基金項目：河北省現代農業產業技術體系淡水養殖創新團隊資助。
作者簡介：王振富（1971.6.10-），男，大專，高級工程師，承德冷水魚和稻蟹生態養殖技術綜合試驗推廣站骨幹成員。[email protected]
通訊作者：寇景蓮（1969.11.29-），女，高級工程師，承德冷水魚和稻蟹生態養殖技術綜合試驗推廣站站長。[email protected]
DOI：10.3969/j.issn.1004-6755.2015.07.013
硬頭鱒（steelhead，salmongairdneri）拉丁名為Oncorhynchusmykiss，屬鮭形目（Salmoniformes）、鮭科（Salmonidae）、太平洋鮭屬（Oncorhynchus），原產於美國阿拉斯加的kuskokwin河和加拿大不列顛哥倫比亞省的和平河等水域，屬於冷水性魚類。硬頭蹲和虹鱒同為一種，虹鱒為路封型，硬頭鱒為洄遊型（廣鹽性），經過選育、馴化，改變了洄遊習性，可終生生活於淡水中。國內最早是北京康鑫水產公司於1998年從美國引進全雌發眼卵，開始養殖硬頭鱒。硬頭鱒的肉色和肉質優於虹鱒，在飼料利用率、抗病力等生產性能方面也明顯強於虹鱒，生長速度比虹鱒快10%～20%，尤其體重大於250g以後，生長優勢更為明顯。硬頭鱒最佳生長水溫為10～18℃，低於8℃或高於22℃都會影響其攝食及生長，與虹鱒相同。硬頭鱒引進、養殖時間不長，種質還未發現明顯退化，養殖效果較好，受到養殖戶的青睞，是冷水魚主要養殖品種——虹鱒的替代品種，為處於困境的虹鱒魚養殖業帶來了希望，推廣前景廣闊。
由於硬頭鱒眾多優勢，許多科研單位對其進行科學研究，特別是對於胚後從初孵仔魚到上浮仔魚並未見報道，該階段被稱為仔魚早期，其形態建成與分化較快。早期仔魚對環境的適應能力還很弱，對環境的變化非常敏感，該養殖階段對硬頭鱒的成活率有著至關重要的作用。因此，我們對仔魚早期發育進行了觀察，以了解其早期發育過程中形態發育特點，明確各器官形成的關鍵期，分析其器官形成與早期環境相適應的特點，用於指導生產。
1材料與方法
1.1材料
硬頭鱒受精卵為豐寧天河龍養殖有限公司2013年12月25日人工受精卵，放在塑料桶內，水溫5~6℃，經過370℃·d，74d孵化，2014年3月9日開始破膜。
1.2飼養條件。
出膜後的仔魚飼養在直徑為2m的圓形孵化缸內，水源為地下水，水溫6.2℃，採用微流水，水量為每min8～10L，每天用電子比色檢測儀檢測水質，溶氧大於6mg/L，pH7.2。魚卵開始出現破膜仔魚時，應加強檢查，及時清除卵皮和死魚，注意飼育環境的清潔衛生，經常刷洗槽孔，保持水流暢通。
1.3方法
仔魚出膜當天記為0日齡，從0日齡開始每天隨機抽取30尾魚作為觀察材料，用電子數顯卡尺測量卵黃囊仔魚全長及卵黃囊大小，用SZ760連續變倍體視顯微鏡觀察、進行拍照記錄，見表1。
2結果
2.1形態觀察
硬頭鱒早期仔魚為剛破膜到上浮仔魚期間，此階段仔魚靠卵黃囊生長，為內源性營養期；從破膜到上浮經過38d，開口攝食，進入晚期仔魚階段。
2.1.1初孵仔魚剛破膜的仔魚全長16.06mm，卵黃囊長徑6.77mm，短徑5.26mm。全身透明，卵黃囊呈橢圓形；身體為弧形，頭部較小並向腹面彎曲，鰓裂形成，卵黃囊血管清晰，脊柱也呈弧形彎曲，並在尾部稍向背面彎曲；心臟為管狀，在卵黃囊腹面靠前的部位。仔魚眼球黑色，肛門位於魚體後1/3處，直腸管狀，仔魚健壯，匍匐於水底，受刺激遊動。鰭膜發達，背鰭、臀鰭、尾鰭鰭膜連成一片，背鰭膜起始於頭後部，臀鰭膜起始於卵黃囊後。尾部鰭褶寬大，呈扇形，為剛出膜仔魚主要的運動器官（圖1a）。
2.1.21～3日齡全長16.58mm，卵黃囊長徑6.41mm、短徑5.05mm。頭部及背部黑色素密集，色素細胞為點狀、星芒狀，仔魚的身體逐漸伸直，頭部增大並隆起，整個眼睛呈黑色。鰓比較明顯，開始分化，卵黃囊上有一粗血管，周圍密布發達的毛細血管網，出現口裂。仔魚匍匐於水底，少遊動（圖1b）。
2.1.36日齡全長18.23mm，卵黃囊長徑6?19mm、短徑4.66mm。仔魚視網膜著色，眼球色素增多，出現鼻囊，鰭褶出現，形成鰭條但不明顯，心跳比較明顯，達到74次/min。卵黃囊逐漸被吸收，油球因為被吸收而變小。卵黃囊上色素沉積較多，仔魚尾部也開始沉積色素。尾鰭鰭膜中密布毛細血管網；腹鰭原基開始出現（圖1c）。
2.1.410日齡全長19.36mm，卵黃囊長徑6.01mm、短徑4.60mm。眼晶體明顯，眼部增厚，鰓絲露出鰓蓋，並可見鰓中有淡紅色的血液流動，說明鰓開始具有呼吸能力，卵黃囊腹部凹陷。頭部、第一背鰭、第二背鰭間鰭膜消失，第一背鰭獨立出來；體腔黃色，空腔，體腔上方可見黑色組織器官；仔魚體色變深，頭部色素點密集，色素點背部較密，鰭褶比較明顯，鰭條清晰，開始充血（圖1d）。
2.1.515日齡全長20.27mm，卵黃囊長徑5.89mm、短徑4.21mm。仔魚口開啟，心臟彎曲，心跳次數達到80次/min，血流清晰可見，心臟和主動脈中充滿淡紅色血液。第一背鰭基部出現雪花狀黑色素點擴散，背鰭與尾鰭之間的鰭褶逐漸退化，兩者之間的界限逐漸明顯；各鰭條上均有黑色素點和黃色素點，仔魚頭部逐漸變寬，頭蓋骨隆起。（圖1e）
2.1.620日齡全長21.58mm，卵黃囊長徑5.49mm、短徑3.84mm。兩個鼻孔比較明顯，下頜可動，吻端比較明顯，體色素加深，黑色素點密布全身，背部、腹部均有；肝臟出現，卵黃囊後方十二指腸部分明顯變小，並可見其內金黃色的油滴；魚體斑點由黑色素聚集而成，腹部卵黃囊已經接近消失。腹鰭出現鰭條，全身除腹鰭膜未消失外，其餘鰭膜都已消失。仔魚從腹部貼於水底，不再側臥，背鰭、尾鰭、腹鰭分化明顯，游泳能力增強（圖1f）。
2.1.726日齡全長22.15mm，卵黃囊長徑5.19mm、短徑3.37mm，卵黃囊明顯縮小。魚體全身呈黑色，仔魚能平衡游泳，魚鰾已形成。出現支鰭軟骨，胸鰭向後伸展，色素點在尾鰭上、下端邊緣最多，聚集成片（圖1g）。
2.1.832日齡全長23.24mm，卵黃囊長徑4.75mm、短徑2.81mm。整個眼睛的視網膜部分呈金色，卵黃囊吸收完畢，腸內仍有黃色油滴，胎糞也開始排出，身體開始變粗，此時仔魚為內外混合營養期，仔魚能平衡游泳。身體側面出現大小不一的斑點，側線附近斑點較大，靠近背部斑點較小。第一背鰭前端黑色，鰭條上有黑色素（圖1h）。
2.1.938日齡全長24.62mm，卵黃囊長徑4.55mm、短徑2.16mm。身體色素增強，鰓蓋形成，腸管貫通，鰾充氣，運動能力增強，可作長時間游泳，不再停留水底。第一背鰭上黑色素點逐漸變多，紅色素逐漸減少，魚體腹部鱗片覆蓋基本完成。身體變粗，嘴前凸，頭變窄，外形逐漸接近成魚（圖1i）。
3分析與討論
3.1溫度對卵黃囊仔魚發育的影響
硬頭鱒早期仔魚是指破膜至上浮這一階段的仔魚，此時仔魚靠卵黃囊提供營養，為內源性營養期，因此又稱為卵黃囊仔魚，早期仔魚主要進行感覺、攝食、呼吸和游泳等器官分化。初孵仔魚卵黃囊較大，是仔魚發育所需能量的主要來源，此時的仔魚沒有攝食能力，不能獲得外源性營養，隨著仔魚的發育卵黃囊逐漸被吸收變小，卵黃營養對於仔魚的發育和生存具有非常重要的意義。仔魚上浮後開口攝食，主要器官發育和形態變異完成，即進入晚期仔魚階段，此時為混合營養期，卵黃囊吸收完畢後即進入外源性營養期。
本研究證明，水溫6.11℃時從破膜到上浮仔魚需經過35d，水溫10～11℃時只需12d。承德試驗基地水溫較低，硬頭鱒早期仔魚發育時間長，卵黃囊吸收慢，器官發育慢，兩三天內變化不明顯。在苗種培育生產中，應根據以上規律，在早期仔魚階段儘量為其創造良好的發育條件，使其各功能器官均衡發育，保證其順利開口。
3.2硬頭鱒早期仔魚卵黃囊吸收特點
硬頭鱒早期仔魚發育時卵黃囊變化具以下特點：
短徑縮減遠遠大於長徑，比長徑快近一倍（圖2）；體積縮減最快，到上浮時只剩初孵仔魚的12?33%，面積縮減次之，剩原來的27.60%（圖3）。
硬頭鱒仔魚個體相對較大，生長迅速，到上浮開口時全長已經近25mm，因此適應環境的能力較強，苗種培育成活率較高。尤其在承德基地環境溫度較低的情況下，挑選個體相對較大的魚作為親魚，所產卵卵徑也會較大，初孵仔魚生長迅速，適應環境的能力較強，對降低苗種開口餌料人工馴化難度，提高苗種成活率具有重要意義。
4小結
通過對硬頭鱒卵黃囊仔魚發育觀察，仔魚早期形態建成與分化較快，卵黃囊仔魚的感覺、攝食、呼吸、游泳等器官快速分化，但其對環境的適應能力還很弱，對環境變化非常敏感，因此，對仔魚早期發育進行觀察，了解其發育過程中形態發育特點，明確各器官形成的關鍵期，對於指導生產，提高苗種早期發育成活率具有重要意義。
（收稿日期：2015-04-20）
（1.承德市水產技術推廣站，河北承德067000；2.河北省海洋與水產科學研究院，
河北秦皇島066200；3.承德市水產工作站，河北承德067000）
基金項目：河北省現代農業產業技術體系淡水養殖創新團隊資助。
作者簡介：王振富（1971.6.10-），男，大專，高級工程師，承德冷水魚和稻蟹生態養殖技術綜合試驗推廣站骨幹成員。[email protected]
通訊作者：寇景蓮（1969.11.29-），女，高級工程師，承德冷水魚和稻蟹生態養殖技術綜合試驗推廣站站長。[email protected]
DOI：10.3969/j.issn.1004-6755.2015.07.013
硬頭鱒（steelhead，salmongairdneri）拉丁名為Oncorhynchusmykiss，屬鮭形目（Salmoniformes）、鮭科（Salmonidae）、太平洋鮭屬（Oncorhynchus），原產於美國阿拉斯加的kuskokwin河和加拿大不列顛哥倫比亞省的和平河等水域，屬於冷水性魚類。硬頭蹲和虹鱒同為一種，虹鱒為路封型，硬頭鱒為洄遊型（廣鹽性），經過選育、馴化，改變了洄遊習性，可終生生活於淡水中。國內最早是北京康鑫水產公司於1998年從美國引進全雌發眼卵，開始養殖硬頭鱒。硬頭鱒的肉色和肉質優於虹鱒，在飼料利用率、抗病力等生產性能方面也明顯強於虹鱒，生長速度比虹鱒快10%～20%，尤其體重大於250g以後，生長優勢更為明顯。硬頭鱒最佳生長水溫為10～18℃，低於8℃或高於22℃都會影響其攝食及生長，與虹鱒相同。硬頭鱒引進、養殖時間不長，種質還未發現明顯退化，養殖效果較好，受到養殖戶的青睞，是冷水魚主要養殖品種——虹鱒的替代品種，為處於困境的虹鱒魚養殖業帶來了希望，推廣前景廣闊。
由於硬頭鱒眾多優勢，許多科研單位對其進行科學研究，特別是對於胚後從初孵仔魚到上浮仔魚並未見報道，該階段被稱為仔魚早期，其形態建成與分化較快。早期仔魚對環境的適應能力還很弱，對環境的變化非常敏感，該養殖階段對硬頭鱒的成活率有著至關重要的作用。因此，我們對仔魚早期發育進行了觀察，以了解其早期發育過程中形態發育特點，明確各器官形成的關鍵期，分析其器官形成與早期環境相適應的特點，用於指導生產。
1材料與方法
1.1材料
硬頭鱒受精卵為豐寧天河龍養殖有限公司2013年12月25日人工受精卵，放在塑料桶內，水溫5~6℃，經過370℃·d，74d孵化，2014年3月9日開始破膜。
1.2飼養條件。
出膜後的仔魚飼養在直徑為2m的圓形孵化缸內，水源為地下水，水溫6.2℃，採用微流水，水量為每min8～10L，每天用電子比色檢測儀檢測水質，溶氧大於6mg/L，pH7.2。魚卵開始出現破膜仔魚時，應加強檢查，及時清除卵皮和死魚，注意飼育環境的清潔衛生，經常刷洗槽孔，保持水流暢通。
1.3方法
仔魚出膜當天記為0日齡，從0日齡開始每天隨機抽取30尾魚作為觀察材料，用電子數顯卡尺測量卵黃囊仔魚全長及卵黃囊大小，用SZ760連續變倍體視顯微鏡觀察、進行拍照記錄，見表1。
2結果
2.1形態觀察
硬頭鱒早期仔魚為剛破膜到上浮仔魚期間，此階段仔魚靠卵黃囊生長，為內源性營養期；從破膜到上浮經過38d，開口攝食，進入晚期仔魚階段。
2.1.1初孵仔魚剛破膜的仔魚全長16.06mm，卵黃囊長徑6.77mm，短徑5.26mm。全身透明，卵黃囊呈橢圓形；身體為弧形，頭部較小並向腹面彎曲，鰓裂形成，卵黃囊血管清晰，脊柱也呈弧形彎曲，並在尾部稍向背面彎曲；心臟為管狀，在卵黃囊腹面靠前的部位。仔魚眼球黑色，肛門位於魚體後1/3處，直腸管狀，仔魚健壯，匍匐於水底，受刺激遊動。鰭膜發達，背鰭、臀鰭、尾鰭鰭膜連成一片，背鰭膜起始於頭後部，臀鰭膜起始於卵黃囊後。尾部鰭褶寬大，呈扇形，為剛出膜仔魚主要的運動器官（圖1a）。
2.1.21～3日齡全長16.58mm，卵黃囊長徑6.41mm、短徑5.05mm。頭部及背部黑色素密集，色素細胞為點狀、星芒狀，仔魚的身體逐漸伸直，頭部增大並隆起，整個眼睛呈黑色。鰓比較明顯，開始分化，卵黃囊上有一粗血管，周圍密布發達的毛細血管網，出現口裂。仔魚匍匐於水底，少遊動（圖1b）。
2.1.36日齡全長18.23mm，卵黃囊長徑6?19mm、短徑4.66mm。仔魚視網膜著色，眼球色素增多，出現鼻囊，鰭褶出現，形成鰭條但不明顯，心跳比較明顯，達到74次/min。卵黃囊逐漸被吸收，油球因為被吸收而變小。卵黃囊上色素沉積較多，仔魚尾部也開始沉積色素。尾鰭鰭膜中密布毛細血管網；腹鰭原基開始出現（圖1c）。
2.1.410日齡全長19.36mm，卵黃囊長徑6.01mm、短徑4.60mm。眼晶體明顯，眼部增厚，鰓絲露出鰓蓋，並可見鰓中有淡紅色的血液流動，說明鰓開始具有呼吸能力，卵黃囊腹部凹陷。頭部、第一背鰭、第二背鰭間鰭膜消失，第一背鰭獨立出來；體腔黃色，空腔，體腔上方可見黑色組織器官；仔魚體色變深，頭部色素點密集，色素點背部較密，鰭褶比較明顯，鰭條清晰，開始充血（圖1d）。
2.1.515日齡全長20.27mm，卵黃囊長徑5.89mm、短徑4.21mm。仔魚口開啟，心臟彎曲，心跳次數達到80次/min，血流清晰可見，心臟和主動脈中充滿淡紅色血液。第一背鰭基部出現雪花狀黑色素點擴散，背鰭與尾鰭之間的鰭褶逐漸退化，兩者之間的界限逐漸明顯；各鰭條上均有黑色素點和黃色素點，仔魚頭部逐漸變寬，頭蓋骨隆起。（圖1e）
2.1.620日齡全長21.58mm，卵黃囊長徑5.49mm、短徑3.84mm。兩個鼻孔比較明顯，下頜可動，吻端比較明顯，體色素加深，黑色素點密布全身，背部、腹部均有；肝臟出現，卵黃囊後方十二指腸部分明顯變小，並可見其內金黃色的油滴；魚體斑點由黑色素聚集而成，腹部卵黃囊已經接近消失。腹鰭出現鰭條，全身除腹鰭膜未消失外，其餘鰭膜都已消失。仔魚從腹部貼於水底，不再側臥，背鰭、尾鰭、腹鰭分化明顯，游泳能力增強（圖1f）。
2.1.726日齡全長22.15mm，卵黃囊長徑5.19mm、短徑3.37mm，卵黃囊明顯縮小。魚體全身呈黑色，仔魚能平衡游泳，魚鰾已形成。出現支鰭軟骨，胸鰭向後伸展，色素點在尾鰭上、下端邊緣最多，聚集成片（圖1g）。
2.1.832日齡全長23.24mm，卵黃囊長徑4.75mm、短徑2.81mm。整個眼睛的視網膜部分呈金色，卵黃囊吸收完畢，腸內仍有黃色油滴，胎糞也開始排出，身體開始變粗，此時仔魚為內外混合營養期，仔魚能平衡游泳。身體側面出現大小不一的斑點，側線附近斑點較大，靠近背部斑點較小。第一背鰭前端黑色，鰭條上有黑色素（圖1h）。
2.1.938日齡全長24.62mm，卵黃囊長徑4.55mm、短徑2.16mm。身體色素增強，鰓蓋形成，腸管貫通，鰾充氣，運動能力增強，可作長時間游泳，不再停留水底。第一背鰭上黑色素點逐漸變多，紅色素逐漸減少，魚體腹部鱗片覆蓋基本完成。身體變粗，嘴前凸，頭變窄，外形逐漸接近成魚（圖1i）。
3分析與討論
3.1溫度對卵黃囊仔魚發育的影響
硬頭鱒早期仔魚是指破膜至上浮這一階段的仔魚，此時仔魚靠卵黃囊提供營養，為內源性營養期，因此又稱為卵黃囊仔魚，早期仔魚主要進行感覺、攝食、呼吸和游泳等器官分化。初孵仔魚卵黃囊較大，是仔魚發育所需能量的主要來源，此時的仔魚沒有攝食能力，不能獲得外源性營養，隨著仔魚的發育卵黃囊逐漸被吸收變小，卵黃營養對於仔魚的發育和生存具有非常重要的意義。仔魚上浮後開口攝食，主要器官發育和形態變異完成，即進入晚期仔魚階段，此時為混合營養期，卵黃囊吸收完畢後即進入外源性營養期。
本研究證明，水溫6.11℃時從破膜到上浮仔魚需經過35d，水溫10～11℃時只需12d。承德試驗基地水溫較低，硬頭鱒早期仔魚發育時間長，卵黃囊吸收慢，器官發育慢，兩三天內變化不明顯。在苗種培育生產中，應根據以上規律，在早期仔魚階段儘量為其創造良好的發育條件，使其各功能器官均衡發育，保證其順利開口。
3.2硬頭鱒早期仔魚卵黃囊吸收特點
硬頭鱒早期仔魚發育時卵黃囊變化具以下特點：
短徑縮減遠遠大於長徑，比長徑快近一倍（圖2）；體積縮減最快，到上浮時只剩初孵仔魚的12?33%，面積縮減次之，剩原來的27.60%（圖3）。
硬頭鱒仔魚個體相對較大，生長迅速，到上浮開口時全長已經近25mm，因此適應環境的能力較強，苗種培育成活率較高。尤其在承德基地環境溫度較低的情況下，挑選個體相對較大的魚作為親魚，所產卵卵徑也會較大，初孵仔魚生長迅速，適應環境的能力較強，對降低苗種開口餌料人工馴化難度，提高苗種成活率具有重要意義。
4小結
通過對硬頭鱒卵黃囊仔魚發育觀察，仔魚早期形態建成與分化較快，卵黃囊仔魚的感覺、攝食、呼吸、游泳等器官快速分化，但其對環境的適應能力還很弱，對環境變化非常敏感，因此，對仔魚早期發育進行觀察，了解其發育過程中形態發育特點，明確各器官形成的關鍵期，對於指導生產，提高苗種早期發育成活率具有重要意義。
（收稿日期：2015-04-20）
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