作者：張靜霜，朱西傑，朱微微，陳健茂，吳璟，李衛強
【摘要】
目的觀察復方蜥蜴散對慢性萎縮性胃炎（Chronic Atrophic Gastritis，CAG）模型大鼠腫瘤壞死因子-α（TNF－α）及胃黏膜病理形態學的影響,探討其 治療 CAG的作用機制。方法將90隻SD雄性大鼠隨機分為正常組，模型組，復方蜥蜴散大、中、小劑量組及維酶素組,除正常組以外，均採取55℃熱鹽水、2%水楊酸、20 mmol/L脫氧膽酸鈉3個致萎縮因素配合饑飽失常造成CAG模型大鼠,分別運用復方蜥蜴散大、中、小劑量及維酶素治療,觀察各組大鼠血清TNF－α的含量及胃黏膜的病 理學 形態。結果蜥蜴散大、中、小劑量組血清中TNF-α含量顯著低於模型組（P<0.01），蜥蜴散大、中劑量組血清中TNF-α含量顯著低於維酶素組（P<0.05）。各組胃黏膜組織形態學觀察，復方蜥蜴散組較模型組及維酶素組有明顯改善。結論復方蜥蜴散可以使CAG模型大鼠血清中TNF－α含量降低，能夠明顯改善CAG模型大鼠胃黏膜的炎症、萎縮性病變,對CAG模型大鼠有明顯的治療作用。
【關鍵詞】 慢性萎縮性胃炎 復方蜥蜴散 腫瘤壞死因子-α 病理組織學
Abstract：ObjectiveTo investigate the effect of compound lizards powder(TCLP) ,a compound Chinese medicine ,on the tumor necrosis factor－α(TNF－α), and gastric mucosa pathological change in rat model of Chronic Atrophic Gastritis（CAG）. and the mechanisms.MethodsNinety male SD rats were randomly divided into six groups:the normal control group,the model group，the Vitacoenzyme control group，the low-dose,middle-dose and high-dose TCLP groups. Except normal control group, other groups took 55℃ hot water which contained 150g/L NaCl,2% Salieylas and 20mmol/L sodium deoxyeholate,combined with overeating and hungering.All rats were treated with different medicines，after a month the rats were sacrificed，and thEir gastric mucosa and serum were collected to detect the serum level of TNF－α and observe the histology mucosa changes by microscope.ResultsCompared with model group，the serum level of TNF－α in the rats of all TCLP groups was significantly lowered(P<0.01). Compared with Vitacoenzyme control group the serum level of TNF－α in the rats of middle-dose and high-dose TCLP groups was significantly lowered(P<0.05), and the pathological changes were significant. ConclusionTCLP can significantly adjust level of TNF－α,and has protective function against the gastric mucosal injury.
Key words： Chronic Atrophic Gastritis (CAG); The compound lizards powder; Tumor Putrescence Factor (TNF); Pathological histology
慢性萎縮性胃炎(Chronic Atrophic Gastritis，CAG)是消化系統的常見病，其以胃黏膜變薄、固有腺體萎縮或伴有腸化、異型增生為主要病理改變。CAG與胃息肉同時存在或腸化生合併中度或高度不典型增生時可發生癌變，張玲霞等［1］對CAG患者10～20年的隨訪發現,有5%～10%的患者發生了胃癌,WHO將其列為胃癌前期狀態。本課題以朱西傑教授治療CAG療效確切的臨床驗方復方蜥蜴散(the compound Lizards Powder，TCLP；以下簡稱蜥蜴散),來觀察其對CAG模型大鼠腫瘤壞死因子－α（Tumor Necrosis Factor－α，TNF－α）及胃黏膜病理組織學的影響，探討其對CAG的治療機理，為臨床治療提供依據。
1 材料與儀器
1.1 動物清潔級SD雄性大鼠90隻，鼠齡8周，體質量（180±20）g；標準顆粒飼料，均由寧夏醫科大學實驗動物中心提供，合格證號sc-xk(寧)2005-001。
1.2 藥物及試劑蜥蜴散：由蜥蜴粉、鹿角霜粉、海螵蛸粉、炒白朮粉、半枝蓮粉等組成，由寧夏醫科大學中醫消化病研究所提供。維酶素：0.2 g/片,新鄉恆久遠藥業有限公司生產，批號20080311；脫氧膽酸鈉：北京市海淀區微生物培養基製品廠生產(含量>95%)，批號: 080716；氯化鈉：天津市福晨化學試劑廠生產(含量≥99.5%)，批號:20080624；水楊酸：天津市福晨化學試劑廠生產(含量≥99.5%)，批號：20080427；腫瘤壞死因子放射免疫分析藥盒:北京科美東雅生物技術有限公司出品，批號：S20063093。
1.3 儀器與設備數顯恆溫水浴箱：北京長源實驗設備廠生產。 電子 天平AL104:梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司生產；TD5A-WS台式離心機：長沙湘儀離心儀器有限公司出品。
2 方法
2.1 藥物配製①脫氧膽酸鈉溶液:用生理鹽水配成20 mmol/L的脫氧膽酸鈉溶液(pH值7～7.8)。②氯化鈉溶液:用雙蒸水配成150 g/L的氯化鈉溶液，臨用時加熱至55℃；用雙蒸水配成0.9%的氯化鈉溶液。③水楊酸溶液:用生理鹽水配成濃度為2%的水楊酸溶液。④維酶素混懸液: 維酶素片研末，用生理鹽水配成0.1/m1的混懸液。⑤蜥蜴散糊劑：蜥蜴散經過粉碎、高溫滅菌、蒸2h，晾乾後，用雙蒸水分別配成0.28，0.14，0.07 g/ml糊劑混懸液裝瓶，4℃冰箱保存備用。
2.2 動物分組將90隻SD雄性大鼠隨機分為正常組（A組）、模型組（B組）、維酶素組（C組）、蜥蜴散大劑量組（D組）、蜥蜴散中劑量組（E組）、蜥蜴散小劑量組（F組）6組，每組15隻，除A組外，其餘大鼠均給予造模處理。
2.3 動物模型的建立及處理措施
2.3.1 CAG模型的建立參閱大量的 文獻 資料［2～6］，結合中西醫理論，具體的造模方法為∶配製濃度為150 g/L鹽水，加熱到55℃，10 ml/kg·d，灌胃，1次/d；2%水楊酸溶液10 ml/kg·d，灌胃，1次/d；20 mmol/L脫氧膽酸鈉溶液，自由飲用;同時配以饑飽失常處理，即2 d飽食，ld禁食。B～F組按上述造模方法造模90 d，A組大鼠充足供應標準顆粒飼料及清潔自來水。
2.3.2 處理措施分別在造模第30天、60天、90天各組處死1隻大鼠，取胃黏膜做病檢以證實造模成功後， A組大鼠仍然充足供食及飲清潔自來水，B～F組大鼠則停止造模，A組與 B組大鼠開始給予生理鹽水10 ml/(kg·d)灌胃，1次/d；C組大鼠給予0.1/ml維酶素混懸液10 ml/(kg·d)灌胃，1次/ d；D組、E組、F組大鼠分別給予蜥蜴散大劑量（20 g/kg·d）、中劑量（10 g/kg·d）、小劑量（5 g/kg·d）灌胃，1次/d；連續用藥1個月(蜥蜴散中劑量按照正常人劑量換算而來，大劑量加倍，小劑量減半)。
2.4 標本採集和處理至預定階段，大鼠禁食24 h後，全部用l0%水合氯醛溶液腹腔內注射麻醉大鼠，心臟取血5 ml置於無菌試管，待測。剖腹，距賁門和幽門1.5 cm離斷取出全胃並處死。沿胃大彎側剖開，冰生理鹽水沖洗後，濾紙吸干鋪開。胃黏膜標本固定於10%的中性福馬林溶液中，固定48 h後剪成約2 mm的條狀物，石蠟包埋，常規切片，HE染色，觀察病理組織學改變。
2.5 用放射免疫法測定血清TNF－α取血2 ml，在4℃，4 000 r/min條件下離心10 min，取上清液，零下 20℃凍存。測定方法採用固相放射免疫檢測嚴格按說明書操作，在曲線上查得的待測樣品的含量，以ng/ml表示。
2.6 統計學處理TNF－α數據採用±s表示，數據採用SPSS 11.5統計軟體處理。
3 結果
3.1 CAG大鼠血清TNF－α檢測結果各治療組與模型組比較（P<0.01）說明各治療組對CAG均有顯著療效，蜥蜴散大、中劑量組與維酶素組比較P<0.05，說明蜥蜴散大、中劑量組治療效果顯著優於維酶素組；蜥蜴散小劑量組與維酶素組比較P>0.05說明治療效果無明顯差別，考慮為劑量過小引起。蜥蜴散大、小劑量組之間比較（P<0 .05)，蜥蜴散中、小劑量組之間比較（P<0.05），說明蜥蜴散大、中劑量組療效優於小劑量組。結果見表1。表1 不同治療組血清TNFα的含量（略）
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【摘要】
目的觀察復方蜥蜴散對慢性萎縮性胃炎（Chronic Atrophic Gastritis，CAG）模型大鼠腫瘤壞死因子-α（TNF－α）及胃黏膜病理形態學的影響,探討其 治療 CAG的作用機制。方法將90隻SD雄性大鼠隨機分為正常組，模型組，復方蜥蜴散大、中、小劑量組及維酶素組,除正常組以外，均採取55℃熱鹽水、2%水楊酸、20 mmol/L脫氧膽酸鈉3個致萎縮因素配合饑飽失常造成CAG模型大鼠,分別運用復方蜥蜴散大、中、小劑量及維酶素治療,觀察各組大鼠血清TNF－α的含量及胃黏膜的病 理學 形態。結果蜥蜴散大、中、小劑量組血清中TNF-α含量顯著低於模型組（P<0.01），蜥蜴散大、中劑量組血清中TNF-α含量顯著低於維酶素組（P<0.05）。各組胃黏膜組織形態學觀察，復方蜥蜴散組較模型組及維酶素組有明顯改善。結論復方蜥蜴散可以使CAG模型大鼠血清中TNF－α含量降低，能夠明顯改善CAG模型大鼠胃黏膜的炎症、萎縮性病變,對CAG模型大鼠有明顯的治療作用。
【關鍵詞】 慢性萎縮性胃炎 復方蜥蜴散 腫瘤壞死因子-α 病理組織學
Abstract：ObjectiveTo investigate the effect of compound lizards powder(TCLP) ,a compound Chinese medicine ,on the tumor necrosis factor－α(TNF－α), and gastric mucosa pathological change in rat model of Chronic Atrophic Gastritis（CAG）. and the mechanisms.MethodsNinety male SD rats were randomly divided into six groups:the normal control group,the model group，the Vitacoenzyme control group，the low-dose,middle-dose and high-dose TCLP groups. Except normal control group, other groups took 55℃ hot water which contained 150g/L NaCl,2% Salieylas and 20mmol/L sodium deoxyeholate,combined with overeating and hungering.All rats were treated with different medicines，after a month the rats were sacrificed，and thEir gastric mucosa and serum were collected to detect the serum level of TNF－α and observe the histology mucosa changes by microscope.ResultsCompared with model group，the serum level of TNF－α in the rats of all TCLP groups was significantly lowered(P<0.01). Compared with Vitacoenzyme control group the serum level of TNF－α in the rats of middle-dose and high-dose TCLP groups was significantly lowered(P<0.05), and the pathological changes were significant. ConclusionTCLP can significantly adjust level of TNF－α,and has protective function against the gastric mucosal injury.
Key words： Chronic Atrophic Gastritis (CAG); The compound lizards powder; Tumor Putrescence Factor (TNF); Pathological histology
慢性萎縮性胃炎(Chronic Atrophic Gastritis，CAG)是消化系統的常見病，其以胃黏膜變薄、固有腺體萎縮或伴有腸化、異型增生為主要病理改變。CAG與胃息肉同時存在或腸化生合併中度或高度不典型增生時可發生癌變，張玲霞等［1］對CAG患者10～20年的隨訪發現,有5%～10%的患者發生了胃癌,WHO將其列為胃癌前期狀態。本課題以朱西傑教授治療CAG療效確切的臨床驗方復方蜥蜴散(the compound Lizards Powder，TCLP；以下簡稱蜥蜴散),來觀察其對CAG模型大鼠腫瘤壞死因子－α（Tumor Necrosis Factor－α，TNF－α）及胃黏膜病理組織學的影響，探討其對CAG的治療機理，為臨床治療提供依據。
1 材料與儀器
1.1 動物清潔級SD雄性大鼠90隻，鼠齡8周，體質量（180±20）g；標準顆粒飼料，均由寧夏醫科大學實驗動物中心提供，合格證號sc-xk(寧)2005-001。
1.2 藥物及試劑蜥蜴散：由蜥蜴粉、鹿角霜粉、海螵蛸粉、炒白朮粉、半枝蓮粉等組成，由寧夏醫科大學中醫消化病研究所提供。維酶素：0.2 g/片,新鄉恆久遠藥業有限公司生產，批號20080311；脫氧膽酸鈉：北京市海淀區微生物培養基製品廠生產(含量>95%)，批號: 080716；氯化鈉：天津市福晨化學試劑廠生產(含量≥99.5%)，批號:20080624；水楊酸：天津市福晨化學試劑廠生產(含量≥99.5%)，批號：20080427；腫瘤壞死因子放射免疫分析藥盒:北京科美東雅生物技術有限公司出品，批號：S20063093。
1.3 儀器與設備數顯恆溫水浴箱：北京長源實驗設備廠生產。 電子 天平AL104:梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司生產；TD5A-WS台式離心機：長沙湘儀離心儀器有限公司出品。
2 方法
2.1 藥物配製①脫氧膽酸鈉溶液:用生理鹽水配成20 mmol/L的脫氧膽酸鈉溶液(pH值7～7.8)。②氯化鈉溶液:用雙蒸水配成150 g/L的氯化鈉溶液，臨用時加熱至55℃；用雙蒸水配成0.9%的氯化鈉溶液。③水楊酸溶液:用生理鹽水配成濃度為2%的水楊酸溶液。④維酶素混懸液: 維酶素片研末，用生理鹽水配成0.1/m1的混懸液。⑤蜥蜴散糊劑：蜥蜴散經過粉碎、高溫滅菌、蒸2h，晾乾後，用雙蒸水分別配成0.28，0.14，0.07 g/ml糊劑混懸液裝瓶，4℃冰箱保存備用。
2.2 動物分組將90隻SD雄性大鼠隨機分為正常組（A組）、模型組（B組）、維酶素組（C組）、蜥蜴散大劑量組（D組）、蜥蜴散中劑量組（E組）、蜥蜴散小劑量組（F組）6組，每組15隻，除A組外，其餘大鼠均給予造模處理。
2.3 動物模型的建立及處理措施
2.3.1 CAG模型的建立參閱大量的 文獻 資料［2～6］，結合中西醫理論，具體的造模方法為∶配製濃度為150 g/L鹽水，加熱到55℃，10 ml/kg·d，灌胃，1次/d；2%水楊酸溶液10 ml/kg·d，灌胃，1次/d；20 mmol/L脫氧膽酸鈉溶液，自由飲用;同時配以饑飽失常處理，即2 d飽食，ld禁食。B～F組按上述造模方法造模90 d，A組大鼠充足供應標準顆粒飼料及清潔自來水。
2.3.2 處理措施分別在造模第30天、60天、90天各組處死1隻大鼠，取胃黏膜做病檢以證實造模成功後， A組大鼠仍然充足供食及飲清潔自來水，B～F組大鼠則停止造模，A組與 B組大鼠開始給予生理鹽水10 ml/(kg·d)灌胃，1次/d；C組大鼠給予0.1/ml維酶素混懸液10 ml/(kg·d)灌胃，1次/ d；D組、E組、F組大鼠分別給予蜥蜴散大劑量（20 g/kg·d）、中劑量（10 g/kg·d）、小劑量（5 g/kg·d）灌胃，1次/d；連續用藥1個月(蜥蜴散中劑量按照正常人劑量換算而來，大劑量加倍，小劑量減半)。
2.4 標本採集和處理至預定階段，大鼠禁食24 h後，全部用l0%水合氯醛溶液腹腔內注射麻醉大鼠，心臟取血5 ml置於無菌試管，待測。剖腹，距賁門和幽門1.5 cm離斷取出全胃並處死。沿胃大彎側剖開，冰生理鹽水沖洗後，濾紙吸干鋪開。胃黏膜標本固定於10%的中性福馬林溶液中，固定48 h後剪成約2 mm的條狀物，石蠟包埋，常規切片，HE染色，觀察病理組織學改變。
2.5 用放射免疫法測定血清TNF－α取血2 ml，在4℃，4 000 r/min條件下離心10 min，取上清液，零下 20℃凍存。測定方法採用固相放射免疫檢測嚴格按說明書操作，在曲線上查得的待測樣品的含量，以ng/ml表示。
2.6 統計學處理TNF－α數據採用±s表示，數據採用SPSS 11.5統計軟體處理。
3 結果
3.1 CAG大鼠血清TNF－α檢測結果各治療組與模型組比較（P<0.01）說明各治療組對CAG均有顯著療效，蜥蜴散大、中劑量組與維酶素組比較P<0.05，說明蜥蜴散大、中劑量組治療效果顯著優於維酶素組；蜥蜴散小劑量組與維酶素組比較P>0.05說明治療效果無明顯差別，考慮為劑量過小引起。蜥蜴散大、小劑量組之間比較（P<0 .05)，蜥蜴散中、小劑量組之間比較（P<0.05），說明蜥蜴散大、中劑量組療效優於小劑量組。結果見表1。表1 不同治療組血清TNFα的含量（略）
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