作者：李曉光，高勤， 翁文，章佩芬，肖飛，羅煥敏
【關鍵詞】五味子；,,多糖；,,製備 方法 ；,, 分析 方法；,,藥理作用
五味子為臨床常用中藥，具有收斂固澀、益氣生津、補腎寧心之功，用於 治療 久嗽虛喘，夢遺滑精，遺尿尿頻，久瀉不止，自汗，盜汗，津傷口渴，短氣脈虛，內熱消渴，心悸失眠等症。《 中國 藥典》2000年版規定五味子為木蘭科植物五味子Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.的乾燥成熟果實。而在此之前臨床上都是將五味子和華中五味子Schisandra sphenantheraRehd.et Wils.(習稱「南五味子」）共同作為五味子 應用 。我國五味子資源豐富，分布廣泛，對於其化學成分和藥理作用的 研究 也比較深入。早期的研究多集中在五味子的脂溶性成分方面，從五味子中分離得到的木脂素類單體化合物有近40種，其藥理作用研究涉及消化系統、心血管系統、中樞神經系統、生殖系統以及抗氧化、抗衰老等各個方面。但傳統用藥習慣以及許多五味子水提液的顯著的藥理活性實驗結果，提示五味子水溶性有效成分的研究不可忽視。20世紀90年代以來，許多學者從五味子水提液中分離得到了多糖有效部位，並對其藥理活性進行研究，本文就此進行概述。
1 製備與分析方法
1.1 提取根據多糖溶於水的性質，一般採用水提取。常用的方法有熱水或熱弱鹼性水浸提法。可直接提取，也可先以無水乙醇或其他有機溶劑脫脂後再進行提取。李巧雲等［1］採用正交設計法對五味子多糖提取工藝進行優選，確定最佳工藝為料液比1∶25，溫度100℃，時間4 h。
1.2 醇沉水提液濃縮後加入乙醇可使多糖沉澱出來。醇沉濃度一般為80%，沉澱靜置24 h以上使其沉澱完全。
1.3 脫蛋白水提液乙醇沉澱物中往往夾雜植物蛋白雜質，通常可採用Savage法、三氯三氟乙烷與Sevage聯用法、酶法與Savage聯用法等方法除去蛋白質。除去蛋白質的樣品用紫外分光光度計檢驗在280 nm處是否有吸收，無吸收則表明蛋白質已除盡。
1.4 脫色五味子粗多糖中含有一些水溶性色素雜質，可採用加入活性炭加熱的方法加以去除。
1.5 其他小分子雜質的去除透析法是利用溶液濃度擴散效應，將分子量小的物質如無機、低聚糖等從透析袋滲透到袋外的蒸餾水中，不斷水即可保持濃度差，從而除盡小分子雜質。張蘭傑等［1］採用DEAE纖維素色譜柱層析去除小分子雜質，取得了較好的效果。得到兩種多糖，分別占北五味子果實重量的0.387%和0.060%。
1.6 分析方法對於五味子多糖一般採用比色法進行含量測定，採用一種或多種單糖混合物為對照品，用苯酚硫酸或蒽酮硫酸為顯色劑，490 nm處分光光度法測定吸收度， 計算 含量。該方法測定出的含量實際是五味子粗多糖中的總糖含量［2，3］。對於五味子多糖的結構分析研究較少，徐世忱等［4］報道五味子多糖的一級結構是由7種以上單糖組成的雜多糖。
2 藥理作用
2.1 保肝五味子粗多糖可使四氯化碳肝損傷小鼠升高的SGPT顯著下降，肝糖元含量顯著升高，並可顯著增加四氯化碳中毒小鼠戊巴比妥鈉睡眠時間［5］。進一步的研究表明，五味子多糖多次灌胃給藥，對四氯化碳中毒小鼠肝中丙二醛含量具明顯降低作用，亦能顯著抑制小鼠肝勻漿脂質過氧化反應。能促進正常小鼠的膽汁分泌和部分肝切除後肝的再生。表明五味子粗多糖的保肝作用與其對抗脂質過氧化、促進肝再生和利膽作用有關［6］。曾靖等採用腹腔注射觀察五味子多糖對小鼠肝糖原合成的 影響 ，發現五味子多糖100 mg/kg及200 mg/kg單次腹腔注射或每日腹腔注射1次連續給藥5 d對小鼠肝糖原的合成均無影響，但能使1.0 mg/kg/d×5 d阿托品增加小鼠肝糖原合成的作用減弱甚至消失，此外五味子多糖對四氯化碳損傷小鼠肝臟所致的SGPT水平也無影響。這些結果提示，五味子多糖可能不是五味子製劑保肝作用的主要有效成分。五味子多糖防止或拮抗適量阿托品增加肝糖原合成的作用及其機制值得進一步研究［7］。
2.2 抗疲勞五味子粗多糖給小鼠按100，200 mg/kg多次灌胃，能明顯提高小鼠的耐缺氧能力，具有抗疲勞作用［8］。
2.3 免疫促進五味子粗多糖能明顯對抗環磷醯胺所致小鼠外周血白細胞的減少，並增加免疫抑制小鼠胸腺和脾臟重量［9，10］。對正常小鼠也可明顯增加免疫器官重量，明顯增強網狀內皮系統對印度墨汁的吞噬能力，可顯著提高腹腔巨噬細胞的吞噬百分率和吞噬指數，促進溶血素及溶血空斑形成，促進淋巴細胞轉化［11，12］。
2.4 抗氧化及抗衰老五味子粗多糖能顯著抑制小鼠肝勻漿脂質過氧化反應，可明顯降低老年大鼠血清過氧化脂質（LPO）含量，提高超氧化物歧化酶（SOD）活性［11~13］。謝大澤等［14］採用黃嘌呤Luminol(XL)和鄰苯三酚Luminol(PL)兩個化學發光系統的研究結果表明，五味子粗多糖具有較強的清除氧自由基的能力。苗明三觀察了五味子多糖對衰老模型小鼠的影響，發現五味子多糖可使衰老小鼠已萎縮的胸腺明顯增大變厚，胸腺皮質細胞數及脾淋巴細胞數明顯增多，脾小結增大，使衰老小鼠已退行性變的神經細胞胞體增大，提示五味子多糖不僅可提高衰老小鼠的免疫功能，也可明顯促進衰老小鼠神經細胞的發育［15］。
2.5 抗腫瘤黃玲等［16］採用腫瘤移植的動物模型，研究五味子多糖的抑瘤率及對免疫器官的影響，結果表明高濃度的五味子多糖有較好的抑瘤作用，高濃度五味子多糖合環磷醯胺抑瘤率達74.5%，五味子多糖對荷瘤小鼠的免疫器官有較好的保護作用，說明五味子多糖能抑制腫瘤的生長，具有預防和治療癌症的潛在價值。進一步的研究表明五味子多糖具有輕度抑瘤形態學表現，能促進細胞凋亡，瘤內及瘤周炎症反應明顯，而瘤細胞壞死則與對照組相當，推測五味子多糖的抑瘤作用可能不是直接殺死瘤細胞，而與細胞凋亡及活化免疫細胞有關［17］。
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【關鍵詞】五味子；,,多糖；,,製備 方法 ；,, 分析 方法；,,藥理作用
五味子為臨床常用中藥，具有收斂固澀、益氣生津、補腎寧心之功，用於 治療 久嗽虛喘，夢遺滑精，遺尿尿頻，久瀉不止，自汗，盜汗，津傷口渴，短氣脈虛，內熱消渴，心悸失眠等症。《 中國 藥典》2000年版規定五味子為木蘭科植物五味子Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.的乾燥成熟果實。而在此之前臨床上都是將五味子和華中五味子Schisandra sphenantheraRehd.et Wils.(習稱「南五味子」）共同作為五味子 應用 。我國五味子資源豐富，分布廣泛，對於其化學成分和藥理作用的 研究 也比較深入。早期的研究多集中在五味子的脂溶性成分方面，從五味子中分離得到的木脂素類單體化合物有近40種，其藥理作用研究涉及消化系統、心血管系統、中樞神經系統、生殖系統以及抗氧化、抗衰老等各個方面。但傳統用藥習慣以及許多五味子水提液的顯著的藥理活性實驗結果，提示五味子水溶性有效成分的研究不可忽視。20世紀90年代以來，許多學者從五味子水提液中分離得到了多糖有效部位，並對其藥理活性進行研究，本文就此進行概述。
1 製備與分析方法
1.1 提取根據多糖溶於水的性質，一般採用水提取。常用的方法有熱水或熱弱鹼性水浸提法。可直接提取，也可先以無水乙醇或其他有機溶劑脫脂後再進行提取。李巧雲等［1］採用正交設計法對五味子多糖提取工藝進行優選，確定最佳工藝為料液比1∶25，溫度100℃，時間4 h。
1.2 醇沉水提液濃縮後加入乙醇可使多糖沉澱出來。醇沉濃度一般為80%，沉澱靜置24 h以上使其沉澱完全。
1.3 脫蛋白水提液乙醇沉澱物中往往夾雜植物蛋白雜質，通常可採用Savage法、三氯三氟乙烷與Sevage聯用法、酶法與Savage聯用法等方法除去蛋白質。除去蛋白質的樣品用紫外分光光度計檢驗在280 nm處是否有吸收，無吸收則表明蛋白質已除盡。
1.4 脫色五味子粗多糖中含有一些水溶性色素雜質，可採用加入活性炭加熱的方法加以去除。
1.5 其他小分子雜質的去除透析法是利用溶液濃度擴散效應，將分子量小的物質如無機、低聚糖等從透析袋滲透到袋外的蒸餾水中，不斷水即可保持濃度差，從而除盡小分子雜質。張蘭傑等［1］採用DEAE纖維素色譜柱層析去除小分子雜質，取得了較好的效果。得到兩種多糖，分別占北五味子果實重量的0.387%和0.060%。
1.6 分析方法對於五味子多糖一般採用比色法進行含量測定，採用一種或多種單糖混合物為對照品，用苯酚硫酸或蒽酮硫酸為顯色劑，490 nm處分光光度法測定吸收度， 計算 含量。該方法測定出的含量實際是五味子粗多糖中的總糖含量［2，3］。對於五味子多糖的結構分析研究較少，徐世忱等［4］報道五味子多糖的一級結構是由7種以上單糖組成的雜多糖。
2 藥理作用
2.1 保肝五味子粗多糖可使四氯化碳肝損傷小鼠升高的SGPT顯著下降，肝糖元含量顯著升高，並可顯著增加四氯化碳中毒小鼠戊巴比妥鈉睡眠時間［5］。進一步的研究表明，五味子多糖多次灌胃給藥，對四氯化碳中毒小鼠肝中丙二醛含量具明顯降低作用，亦能顯著抑制小鼠肝勻漿脂質過氧化反應。能促進正常小鼠的膽汁分泌和部分肝切除後肝的再生。表明五味子粗多糖的保肝作用與其對抗脂質過氧化、促進肝再生和利膽作用有關［6］。曾靖等採用腹腔注射觀察五味子多糖對小鼠肝糖原合成的 影響 ，發現五味子多糖100 mg/kg及200 mg/kg單次腹腔注射或每日腹腔注射1次連續給藥5 d對小鼠肝糖原的合成均無影響，但能使1.0 mg/kg/d×5 d阿托品增加小鼠肝糖原合成的作用減弱甚至消失，此外五味子多糖對四氯化碳損傷小鼠肝臟所致的SGPT水平也無影響。這些結果提示，五味子多糖可能不是五味子製劑保肝作用的主要有效成分。五味子多糖防止或拮抗適量阿托品增加肝糖原合成的作用及其機制值得進一步研究［7］。
2.2 抗疲勞五味子粗多糖給小鼠按100，200 mg/kg多次灌胃，能明顯提高小鼠的耐缺氧能力，具有抗疲勞作用［8］。
2.3 免疫促進五味子粗多糖能明顯對抗環磷醯胺所致小鼠外周血白細胞的減少，並增加免疫抑制小鼠胸腺和脾臟重量［9，10］。對正常小鼠也可明顯增加免疫器官重量，明顯增強網狀內皮系統對印度墨汁的吞噬能力，可顯著提高腹腔巨噬細胞的吞噬百分率和吞噬指數，促進溶血素及溶血空斑形成，促進淋巴細胞轉化［11，12］。
2.4 抗氧化及抗衰老五味子粗多糖能顯著抑制小鼠肝勻漿脂質過氧化反應，可明顯降低老年大鼠血清過氧化脂質（LPO）含量，提高超氧化物歧化酶（SOD）活性［11~13］。謝大澤等［14］採用黃嘌呤Luminol(XL)和鄰苯三酚Luminol(PL)兩個化學發光系統的研究結果表明，五味子粗多糖具有較強的清除氧自由基的能力。苗明三觀察了五味子多糖對衰老模型小鼠的影響，發現五味子多糖可使衰老小鼠已萎縮的胸腺明顯增大變厚，胸腺皮質細胞數及脾淋巴細胞數明顯增多，脾小結增大，使衰老小鼠已退行性變的神經細胞胞體增大，提示五味子多糖不僅可提高衰老小鼠的免疫功能，也可明顯促進衰老小鼠神經細胞的發育［15］。
2.5 抗腫瘤黃玲等［16］採用腫瘤移植的動物模型，研究五味子多糖的抑瘤率及對免疫器官的影響，結果表明高濃度的五味子多糖有較好的抑瘤作用，高濃度五味子多糖合環磷醯胺抑瘤率達74.5%，五味子多糖對荷瘤小鼠的免疫器官有較好的保護作用，說明五味子多糖能抑制腫瘤的生長，具有預防和治療癌症的潛在價值。進一步的研究表明五味子多糖具有輕度抑瘤形態學表現，能促進細胞凋亡，瘤內及瘤周炎症反應明顯，而瘤細胞壞死則與對照組相當，推測五味子多糖的抑瘤作用可能不是直接殺死瘤細胞，而與細胞凋亡及活化免疫細胞有關［17］。
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