作者：李興華，胡昌江，李文兵，黃勤挽，謝秀瓊
【摘要】 目的建立益智藥材中圓柚酮的含量測定方法，並對不同產地藥材進行含量測定。方法採用高效液相色譜法，色譜柱為DiamonsilC18(5 μm，250 mm×4.6 mm)，流動相為乙腈水(65∶35)，檢測波長為235 nm，流速為1.00 ml·min1，柱溫為40℃。結果圓柚酮在0.115 2～0.268 8μg範圍內與峰面積呈良好的線性關係，r=0.999 9；平均回收率為97.34%，RSD=1.48%（n=6）。不同產地益智藥材中圓柚酮的含量在1.50～2.10 mg·g1之間。結論該法可靠、準確、簡便，可作為益智藥材的質量控制方法。
【關鍵詞】 益智； 圓柚酮
ChinaAbstract：ObjectiveTo establish a method for determination of the content of Nootkatone in Fructus Alpinia oxyphyllae，and to determine the content of Nootkatone in Fructus Alpinia oxyphyllae from different places by this new method.MethodsThe DiamonsilC18(5 μm，250 mm×4.6 mm) column was used. The mobile phase was CH3CNH2O(65:35) and the detection wavelength was set at 235 nm.The flow rate was 1.00 ml·min-1 and the column temperature was 40℃. ResultsThe Nootkatone content showed a good linear relationship within the range of 0.115 2～0.268 8μg(r=0.999 9).The average recovery was 97.34% and RSD was 1.48%（n=6）. the content of Nootkatone in Fructus Alpinia oxyphyllae from different places was within the range of 1.50～2.10 mg·g-1.ConclusionThe method is simple and the result was reliable. It can be used for the quality control of this herbal medicine.
Key words： Fructus Alpinia oxyphyllae； Nootkatone
中藥益智，為姜科植物益智Alpinia oxyphylla Miq.的乾燥成熟果實，主產於我國的海南和廣東，為四大南藥之一。其功效為溫脾止瀉，攝唾涎，暖腎，固精縮尿，主治脾寒泄瀉，腹中冷痛，口多涎唾，腎虛遺尿，小便頻數，遺精白濁［1］。我們的前期研究發現，益智石油醚提取部位為其縮尿作用的有效部位，並且通過氣相色譜質譜聯用分析，發現此部位中的主要化學成分為圓柚酮（Nootkatone）［2］。國外已有研究報道，從益智藥材中分離得到的圓柚酮，在抗實驗性胃潰瘍、抑制脂多糖活化巨噬細胞中NO的產生和抑制由抗原引發的RBL2H3細胞的脫落等方面具有顯著的活性，為益智藥材的有效成分之一［3］。而對於益智藥材中圓柚酮的含量情況還未見相關報道。為了更好地控制藥材質量，我們採用高效液相色譜法建立了益智藥材中圓柚酮的含量測定方法，並測定不同產地藥材中圓柚酮的含量。
1 儀器與試藥
Agilent 1100高效液相色譜儀，HPChemStation 6.04軟體包（美國Agilent公司）；賽多利斯Bp211DAG 電子 天平（德國Sartorius公司）；超聲波清洗器CX100（北京醫療設備二廠）。圓柚酮對照品由美國Sigma公司提供(批號：10112423，純度>98%)。乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其餘試劑均為分析純。不同產地的藥材由成都中醫藥大學謝秀瓊教授從各產地收集，並經成都中醫藥大學盧先明教授鑑定為姜科植物益智Alpinia oxyphylla Miq.的乾燥成熟果實。
2 方法與結果
2.1 色譜條件
色譜柱為DiamonsilC18柱(5 μm，250 mm×4.6 mm)；流動相為乙腈水(65∶35)；檢測波長為235 nm；流速為1.00 ml·min-1；柱溫為40℃。靈敏度為0.005AUFS。在選定條件下，圓柚酮與樣品中其他色譜峰達基線分離，其理論塔板數(N)大於4 000。對照品溶液和供試品溶液色譜圖見圖1～2。
2.2 對照品溶液的製備
取圓柚酮對照品適量，精密稱定，置25 ml容量瓶中，用甲醇溶解並稀釋至刻度，製成含圓柚酮0.480 0 mg·ml-1的對照品溶液。
2.3 供試品溶液的製備
取益智藥材，除去雜質及外殼，粉碎，過40目篩。取粉末約0.2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加甲醇25 ml，稱定重量，超聲提取（360 W，35 kHz）30 min，放冷至室溫，再稱定重量，用甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續濾液，用0.45 μm微孔濾膜濾過，即得。
2.4 線性關係考察
精密吸取圓柚酮對照品溶液(0.480 0 mg·ml-1) 0.6，0.8，1.0，1.2，1.4 ml，分別置25 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，進樣10 μl測定峰面積。以對照品進樣量為橫坐標，峰面積積分值為縱坐標繪製標準曲線，則回歸方程為：A=3 237.2C +4.33，r=0.999 9。表明圓柚酮在0.115 2～0.268 8 μg範圍內與峰面積呈良好的線性關係。
2.5 精密度實驗
精密吸取上述對照品溶液10 μl，重複進樣5次，峰面積RSD=0.20%，表明儀器的精密度良好。
轉貼於論文聯盟 http://www.lwlm.com
【摘要】 目的建立益智藥材中圓柚酮的含量測定方法，並對不同產地藥材進行含量測定。方法採用高效液相色譜法，色譜柱為DiamonsilC18(5 μm，250 mm×4.6 mm)，流動相為乙腈水(65∶35)，檢測波長為235 nm，流速為1.00 ml·min1，柱溫為40℃。結果圓柚酮在0.115 2～0.268 8μg範圍內與峰面積呈良好的線性關係，r=0.999 9；平均回收率為97.34%，RSD=1.48%（n=6）。不同產地益智藥材中圓柚酮的含量在1.50～2.10 mg·g1之間。結論該法可靠、準確、簡便，可作為益智藥材的質量控制方法。
【關鍵詞】 益智； 圓柚酮
ChinaAbstract：ObjectiveTo establish a method for determination of the content of Nootkatone in Fructus Alpinia oxyphyllae，and to determine the content of Nootkatone in Fructus Alpinia oxyphyllae from different places by this new method.MethodsThe DiamonsilC18(5 μm，250 mm×4.6 mm) column was used. The mobile phase was CH3CNH2O(65:35) and the detection wavelength was set at 235 nm.The flow rate was 1.00 ml·min-1 and the column temperature was 40℃. ResultsThe Nootkatone content showed a good linear relationship within the range of 0.115 2～0.268 8μg(r=0.999 9).The average recovery was 97.34% and RSD was 1.48%（n=6）. the content of Nootkatone in Fructus Alpinia oxyphyllae from different places was within the range of 1.50～2.10 mg·g-1.ConclusionThe method is simple and the result was reliable. It can be used for the quality control of this herbal medicine.
Key words： Fructus Alpinia oxyphyllae； Nootkatone
中藥益智，為姜科植物益智Alpinia oxyphylla Miq.的乾燥成熟果實，主產於我國的海南和廣東，為四大南藥之一。其功效為溫脾止瀉，攝唾涎，暖腎，固精縮尿，主治脾寒泄瀉，腹中冷痛，口多涎唾，腎虛遺尿，小便頻數，遺精白濁［1］。我們的前期研究發現，益智石油醚提取部位為其縮尿作用的有效部位，並且通過氣相色譜質譜聯用分析，發現此部位中的主要化學成分為圓柚酮（Nootkatone）［2］。國外已有研究報道，從益智藥材中分離得到的圓柚酮，在抗實驗性胃潰瘍、抑制脂多糖活化巨噬細胞中NO的產生和抑制由抗原引發的RBL2H3細胞的脫落等方面具有顯著的活性，為益智藥材的有效成分之一［3］。而對於益智藥材中圓柚酮的含量情況還未見相關報道。為了更好地控制藥材質量，我們採用高效液相色譜法建立了益智藥材中圓柚酮的含量測定方法，並測定不同產地藥材中圓柚酮的含量。
1 儀器與試藥
Agilent 1100高效液相色譜儀，HPChemStation 6.04軟體包（美國Agilent公司）；賽多利斯Bp211DAG 電子 天平（德國Sartorius公司）；超聲波清洗器CX100（北京醫療設備二廠）。圓柚酮對照品由美國Sigma公司提供(批號：10112423，純度>98%)。乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其餘試劑均為分析純。不同產地的藥材由成都中醫藥大學謝秀瓊教授從各產地收集，並經成都中醫藥大學盧先明教授鑑定為姜科植物益智Alpinia oxyphylla Miq.的乾燥成熟果實。
2 方法與結果
2.1 色譜條件
色譜柱為DiamonsilC18柱(5 μm，250 mm×4.6 mm)；流動相為乙腈水(65∶35)；檢測波長為235 nm；流速為1.00 ml·min-1；柱溫為40℃。靈敏度為0.005AUFS。在選定條件下，圓柚酮與樣品中其他色譜峰達基線分離，其理論塔板數(N)大於4 000。對照品溶液和供試品溶液色譜圖見圖1～2。
2.2 對照品溶液的製備
取圓柚酮對照品適量，精密稱定，置25 ml容量瓶中，用甲醇溶解並稀釋至刻度，製成含圓柚酮0.480 0 mg·ml-1的對照品溶液。
2.3 供試品溶液的製備
取益智藥材，除去雜質及外殼，粉碎，過40目篩。取粉末約0.2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加甲醇25 ml，稱定重量，超聲提取（360 W，35 kHz）30 min，放冷至室溫，再稱定重量，用甲醇補足減失重量，搖勻，濾過，取續濾液，用0.45 μm微孔濾膜濾過，即得。
2.4 線性關係考察
精密吸取圓柚酮對照品溶液(0.480 0 mg·ml-1) 0.6，0.8，1.0，1.2，1.4 ml，分別置25 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，進樣10 μl測定峰面積。以對照品進樣量為橫坐標，峰面積積分值為縱坐標繪製標準曲線，則回歸方程為：A=3 237.2C +4.33，r=0.999 9。表明圓柚酮在0.115 2～0.268 8 μg範圍內與峰面積呈良好的線性關係。
2.5 精密度實驗
精密吸取上述對照品溶液10 μl，重複進樣5次，峰面積RSD=0.20%，表明儀器的精密度良好。
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