【摘要】 目的 探討藥桑醇提物與水提物對2型糖尿病（T2DM）大鼠的 治療 作用。方法 採用高脂高糖飲食同時腹腔注射鏈脲佐菌素複製T2DM大鼠模型。將動物隨機分為模型組、拜糖平陽性對照、藥桑醇提物組（20 mg/kg）和水提物組（20 mg/kg），並設置正常對照組。4 w後處死大鼠取血清測定血糖、果糖胺、血脂生化指標〔總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDLC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDLC）〕；取新鮮肝臟測定肝糖原、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）。結果 與正常對照組比較，模型組血糖、果糖胺、MDA、TC、TG、LDLC水平明顯升高(P＜0.01)，肝糖窄、HDLC含量、SOD活性明顯降低(P＜0.05)。與模型組比較，藥桑組各項指標有明顯改善(P＜0.05)。結論 藥桑不同提取物可降低血糖、提高機體抗氧化能力，對T2DM大鼠具有一定的治療作用。
【關鍵詞】 維藥藥桑；2型糖尿病；抗氧化能力
【Abstract】 Objective To investigate the effect of medicine mulberry different extracts on type 2 diabetic mellitus (T2DM). Methods T2DM model rats were established by intraperitoneal injection streptozotocin (STZ) and high sugar and high lipid diet. Model rats were divided into model, baitangping control, medicine mulberry alcohol extract （20 mg/kg）and water extract（20 mg/kg） groups and normal control group was selected. Glucose, fructosamine, total cholesterol (TC), triglyceride (TG), low density lipid protEin cholesterol (LDLC) and high density lipid protEIn cholesterol (HDLC) were detected after 4 weeks. Hepatic glycogen, superoxide dismutase (SOD), malondialdehyde (MDA）in liver tissue were measured. Results Compared with normal control group, glucose, fructosamine, MDA, TC, TG, LDLC were increased in model group (P＜0.01), and hepatic glycogen, HDLC and SOD were decreased (P＜0.05). Compared with model group, medicine mulberry could improve above indexes(P＜0.05). Conclusions Different extracts of medicine mulberry has therapeutic effect on T2DM by decreasing glucose, increasing antioxidant ability.
【Key words】 Medicine mulberry; Type 2 diabetic mellitus; Antioxidant ability
藥桑具有防癌、抗誘變、增強免疫力、保腎護肝、抗衰老、促進造血細胞生長的作用，包含多糖、維生素、微量元素、16種胺基酸及大量黃酮類化合物，因其可降低血脂、血壓及肝組織脂質含量、增加人體膽固醇終端產物排泄作用，故藥桑及其製品是高血脂、高血壓等特殊人群的首選健康食品〔1，2〕。近年藥理研究證實，藥桑提取物對二糖類分解酶活性具有抑制作用，可抑制小腸對雙糖的吸收，降低食後血糖的高峰值；還可以促進β細胞分泌胰島素，進而促進細胞對糖的利用、肝糖原合成以及改善糖代謝，最終達到降血糖的效果〔3，4〕。為了評價藥桑對2型糖尿病(T2DM)的治療效果及作用機制，故本實驗擬利用大鼠T2DM模型進行藥桑醇提物與水提物干預研究。
1 材料與方法
1.1 主要儀器和試劑
Labconco冰凍真空乾燥儀（法國樂高公司），752分光光度計、AE100 電子 天平（ 中國 伯樂公司），960型螢光分光光度計、J2SH高速冰凍離心機、全自動生化儀（日本島津公司），丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、血糖、果糖胺、肝糖原測定試劑盒（南京建成生物工程研究所），鏈脲佐菌素（STZ）（美國Sigma公司），拜糖平（北京拜耳醫藥公司），乙腈、甲醇、甲基叔丁基醚（MTBE）（美國迪馬公司），和田產藥桑（新疆烏魯木齊二道橋大巴扎市場），大孔吸附樹脂（天津農業股份公司）。
1.2 實驗方法
1.2.1 藥桑提取物製備
①藥桑醇提液：1 000 g藥桑加3倍量的95%乙醇，回流提取，在溫度65℃～75℃條件下，提取3 h反覆3次，合併回收乙醇，濃縮提取物，製得浸膏。②藥桑水提液：1 000 g藥桑加3倍量的蒸餾水，回流提取，在溫度65℃～75℃的條件下，提取3 h反覆3次，合併回收水，濃縮提取物，製得浸膏。
1.2.2 T2DM模型製備
兩月齡Wistar清潔級大鼠50隻（雄雌各半）（中國軍事醫學 科學 院實驗動物養殖中心），適應性喂養1 w，隨機選取10隻為正常對照組，灌胃0.9%生理鹽水，其餘40隻灌胃高脂乳劑飼料10 ml/kg（高脂乳劑配方：200 g豬油加熱溶化，加入100 g膽固醇，待溶化後加入20 g膽酸鈉、300 g蔗糖，充分攪勻後加入200 ml吐溫80、200 ml丙二醇及適量蒸餾水，攪拌，待溶解後冷卻至室溫再加適量蒸餾水至1 500 ml並充分混勻，4℃封存，用時37℃水浴加熱溶化）。4 w後除正常對照組外，各組均腹腔注射STZ 40 mg/kg，3 d後尾靜脈取血測血糖，取空腹血糖＞7.8 mmol/L者入選糖尿病模型。40隻模型大鼠隨機分為：模型組、拜糖平陽性對照組(20 mg/kg)、藥桑醇提物組（20 mg/kg）、藥桑水提物組（20 mg/kg）。連續飼養4 w期間，不同藥物組按設定劑量進行灌胃，每日一次，而正常對照組、模型組則灌胃等體積的生理鹽水。觀察各組大鼠的一般狀況、採食和飲水量等。
1.2.3 生化指標測定
4 w末全部大鼠處死，經眼球後靜脈叢取血，3 000 r/min離心10 min分離血清，測定各組血糖、果糖胺、總膽固醇（TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDLC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDLC）水平；開胸後，取肝臟，用4℃生理鹽水沖洗,濾紙吸干，稱重。取肝右葉相同部位的一小塊肝組織，以4℃生理鹽水製成10%肝勻漿，3 000 r/min離心10 min，取上清，測定各組肝組織糖原、SOD、MDA。
1.3 統計學處理
數據用x±s表示，用SPSS10.0軟體進行單因素方差分析。
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【關鍵詞】 維藥藥桑；2型糖尿病；抗氧化能力
【Abstract】 Objective To investigate the effect of medicine mulberry different extracts on type 2 diabetic mellitus (T2DM). Methods T2DM model rats were established by intraperitoneal injection streptozotocin (STZ) and high sugar and high lipid diet. Model rats were divided into model, baitangping control, medicine mulberry alcohol extract （20 mg/kg）and water extract（20 mg/kg） groups and normal control group was selected. Glucose, fructosamine, total cholesterol (TC), triglyceride (TG), low density lipid protEin cholesterol (LDLC) and high density lipid protEIn cholesterol (HDLC) were detected after 4 weeks. Hepatic glycogen, superoxide dismutase (SOD), malondialdehyde (MDA）in liver tissue were measured. Results Compared with normal control group, glucose, fructosamine, MDA, TC, TG, LDLC were increased in model group (P＜0.01), and hepatic glycogen, HDLC and SOD were decreased (P＜0.05). Compared with model group, medicine mulberry could improve above indexes(P＜0.05). Conclusions Different extracts of medicine mulberry has therapeutic effect on T2DM by decreasing glucose, increasing antioxidant ability.
【Key words】 Medicine mulberry; Type 2 diabetic mellitus; Antioxidant ability
藥桑具有防癌、抗誘變、增強免疫力、保腎護肝、抗衰老、促進造血細胞生長的作用，包含多糖、維生素、微量元素、16種胺基酸及大量黃酮類化合物，因其可降低血脂、血壓及肝組織脂質含量、增加人體膽固醇終端產物排泄作用，故藥桑及其製品是高血脂、高血壓等特殊人群的首選健康食品〔1，2〕。近年藥理研究證實，藥桑提取物對二糖類分解酶活性具有抑制作用，可抑制小腸對雙糖的吸收，降低食後血糖的高峰值；還可以促進β細胞分泌胰島素，進而促進細胞對糖的利用、肝糖原合成以及改善糖代謝，最終達到降血糖的效果〔3，4〕。為了評價藥桑對2型糖尿病(T2DM)的治療效果及作用機制，故本實驗擬利用大鼠T2DM模型進行藥桑醇提物與水提物干預研究。
1 材料與方法
1.1 主要儀器和試劑
Labconco冰凍真空乾燥儀（法國樂高公司），752分光光度計、AE100 電子 天平（ 中國 伯樂公司），960型螢光分光光度計、J2SH高速冰凍離心機、全自動生化儀（日本島津公司），丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、血糖、果糖胺、肝糖原測定試劑盒（南京建成生物工程研究所），鏈脲佐菌素（STZ）（美國Sigma公司），拜糖平（北京拜耳醫藥公司），乙腈、甲醇、甲基叔丁基醚（MTBE）（美國迪馬公司），和田產藥桑（新疆烏魯木齊二道橋大巴扎市場），大孔吸附樹脂（天津農業股份公司）。
1.2 實驗方法
1.2.1 藥桑提取物製備
①藥桑醇提液：1 000 g藥桑加3倍量的95%乙醇，回流提取，在溫度65℃～75℃條件下，提取3 h反覆3次，合併回收乙醇，濃縮提取物，製得浸膏。②藥桑水提液：1 000 g藥桑加3倍量的蒸餾水，回流提取，在溫度65℃～75℃的條件下，提取3 h反覆3次，合併回收水，濃縮提取物，製得浸膏。
1.2.2 T2DM模型製備
兩月齡Wistar清潔級大鼠50隻（雄雌各半）（中國軍事醫學 科學 院實驗動物養殖中心），適應性喂養1 w，隨機選取10隻為正常對照組，灌胃0.9%生理鹽水，其餘40隻灌胃高脂乳劑飼料10 ml/kg（高脂乳劑配方：200 g豬油加熱溶化，加入100 g膽固醇，待溶化後加入20 g膽酸鈉、300 g蔗糖，充分攪勻後加入200 ml吐溫80、200 ml丙二醇及適量蒸餾水，攪拌，待溶解後冷卻至室溫再加適量蒸餾水至1 500 ml並充分混勻，4℃封存，用時37℃水浴加熱溶化）。4 w後除正常對照組外，各組均腹腔注射STZ 40 mg/kg，3 d後尾靜脈取血測血糖，取空腹血糖＞7.8 mmol/L者入選糖尿病模型。40隻模型大鼠隨機分為：模型組、拜糖平陽性對照組(20 mg/kg)、藥桑醇提物組（20 mg/kg）、藥桑水提物組（20 mg/kg）。連續飼養4 w期間，不同藥物組按設定劑量進行灌胃，每日一次，而正常對照組、模型組則灌胃等體積的生理鹽水。觀察各組大鼠的一般狀況、採食和飲水量等。
1.2.3 生化指標測定
4 w末全部大鼠處死，經眼球後靜脈叢取血，3 000 r/min離心10 min分離血清，測定各組血糖、果糖胺、總膽固醇（TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDLC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDLC）水平；開胸後，取肝臟，用4℃生理鹽水沖洗,濾紙吸干，稱重。取肝右葉相同部位的一小塊肝組織，以4℃生理鹽水製成10%肝勻漿，3 000 r/min離心10 min，取上清，測定各組肝組織糖原、SOD、MDA。
1.3 統計學處理
數據用x±s表示，用SPSS10.0軟體進行單因素方差分析。
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