【關鍵詞】夜盲/先天性；大鼠；視網膜電圖；生 理學 ；生物化學
physiological and biochemical data in model rats of congenital stationary night blindness
【Abstract】 AIM: To determine the basic physiological and biochemical data in a natural occurring mutant rats of congenital stationary night blindness（CSNB）． METHODS: Forty CSNB rats in F11 and F12 (20 female and 20 male) and 5 SD rats, aged from 13 to 15 weeks, were examined by electroretinogram (ERG) technique to evaluate the inherited traits under anaesthesia. The blood was then collected from the abdominal vEin in torrefied tubes to measure the biochemical parameters. Then heart, liver, spleen, lung, brain (cerebrum, cerebellum, brain stem), pituitary, kidney, adrenal gland and testicle were taken to weigh. RESULTS: There were significant differences in organ weight between two sexes in CSNB rat (P<0.05), except for spleen,adrenal gland, pituitary. The coefficients of organs were significantly higher in female CSNB rats than that of the male except for kidney (P<0.01). The GLU, CHO, ALB were higher, and ALT, AST, ALP, BUN, CRE, TG, TP were lower in female rats; the result of electrolyte was that K, Na and iCa were higher in the male, Cl was higher in female, but there were no significant differences between female and male in statistics (P>0.05). CONCLUSION: The basic physiological and biochemical data of CSNB rat strain are in normal range. There are significant differences in some basic physiological and biochemical data between female and male CSNB rats, but not lots between CSNB rats and control SD rats. CSNB rat will become a new mutant model rat for researches on inherited retinal disease.
【Keywords】 night blindness/congenital; rat; electroretinogram; physiology; biochemistry
【摘要】 目的：對本實驗室首先發現並培育的自發性先天性靜止性夜盲(CSNB)大鼠的主要臟器及血液、生化指標進行檢測. 方法 ：隨機選取出生13～15 wk的第11，12代CSNB大鼠通過視網膜電圖鑑定後，抽取靜脈血進行血清生化相關指標的檢測，並對其重要臟器進行準確稱量. 結果： CSNB大鼠臟器質量在雌雄之間除脾臟、腎上腺、腦垂體外，其餘均存在顯著差異（P<0.05）；臟器係數大腦、小腦、腦幹雌雄間存在非常顯著差異（P<0.01）；生化指標葡萄糖、總膽固醇和白蛋白在雌性大於雄性，丙氨酸基轉換酶、天門冬氨酸基轉換酶、鹼性磷酸酶、尿素氮、肌酐、甘油三酯和總蛋白在雌性小於雄性；血電解質K＋，Na＋，離子鈣（iCa）在雄性大於雌性， 雌性的Cl-值高，但無差異. 結論： CSNB大鼠基本生理學和生物化學參數均在正常範圍內，其中一些參數在CSNB大鼠性別之間存在差異,但是與正常對照SD大鼠之間只有個別參數有差異. CSNB大鼠為遺傳性視網膜疾病的 研究 提供了一種新的突變模式動物品系.
【關鍵詞】 夜盲/先天性；大鼠；視網膜電圖；生理學；生物化學
0引言
遺傳性視網膜疾病是致盲的重要原因， 目前 缺乏有效的 治療 手段. 模式動物是研究基因和蛋白功能的重要支撐條件，也是研究疾病防治和藥物開發的重要手段. 目前，日本京都大學正在進行一項生物資源保存計劃，與眼科相關的有6種. 美國Jackson實驗室是目前世界上最大的突變小鼠庫，該實驗室先後發現16種自發性基因突變視網膜疾病模式小鼠［1］. 我們在實驗中發現一種視網膜電圖（ERG）異常大鼠，經遺傳學和視覺電生理學鑑定，確定為一種類似人類先天性靜止性夜盲（congenital stationary night blindness, CSNB）模式大鼠［2-3］，並已經近交繁育至14代. 為建立一種新的、具有我國自主智慧財產權的視網膜疾病模式動物品系，我們對該品系的大鼠基本生理學及生物化學參數進行了測量.
1材料和方法
1.1材料本實驗室發現並培育至第11代及第12代出生的13~15 wk CSNB大鼠40隻，雌雄各半，外眼檢查正常，屈光間質清晰，眼底未見異常. 將動物置於屏障動物實驗室內飼養，予以12 h明暗交替光照，不限食水，室溫22℃～26℃. 正常同齡對照SD大鼠10隻，雌雄各半（第四軍醫大學實驗動物中心提供），在本實驗室條件飼養1 wk後進行實驗. RETIport系統（Roland Consult, 德國）及銀氯化銀角膜電極(自製)； 電子 分析 天平（1/10000，上海分析儀器廠）；全自動生化分析儀（autolab18，義大利）；自動電解質分析儀（DX685，上海訊達醫用電子儀器廠）；常規手術器械，速眠新Ⅱ（軍事醫學 科學 院軍事獸醫研究所，批號：005013）等.
1.2方法
1.2.1視覺電生理學檢測按 文獻 ［4］的方法，採用RETIport系統進行視杆細胞反應（rodERG）、最大混合反應（MaxERG）、振蕩電位（OPs）、明適應視網膜電圖（PhotERG）和閃爍光視網膜電圖（FlickerERG）記錄. 大鼠在實驗前12 h予以暗適應後先進行暗適應視網膜電圖記錄，再進行10 min明適應後記錄PhotERG和20 Hz FlickerERG. 觀察MaxERG 的a,b波，OPs的O2波和20 Hz FlickerERG的P1波潛伏期和幅值的變化.
1.2.2血液標本採集及檢測將CSNB大鼠禁食禁水12 h，採用乙醚麻醉後開腹，於腹腔靜脈抽取靜脈血3 mL，將血液注入乾燥管內，3000 r/min離心10 min，取血清用全自動生化分析儀測定血清天門冬氨酸基轉換酶(GOT)、丙氨酸基轉換酶(GPT)、鹼性磷酸酶(ALP)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、葡萄糖(GLU)、總膽固醇(CHO)、甘油三酯（TG）等指標. 經自動電解質分析儀測定K＋，Na＋，Cl－及離子鈣（iCa）.
1.2.3臟器質量檢查將以上動物在取血後放血處死，並立即剖取腦、心、肺、肝、脾、腎、腎上腺、睪丸等臟器，用電子天平稱其質量. 在心臟的大血管出入處剪斷血管，在左右肺門處剪斷支氣管，在腎門處剪斷血管，腦組織以大腦腳為界分開大腦、腦幹，延髓終止於錐體交叉. 除去上述器官周圍的脂肪、筋膜，用濾紙吸盡臟器表面的血液和水分後用分析天平稱質量，將左右肺、左右腎、左右睪丸合併稱其質量.
1.2.4數據測量 應用 RETIport系統進行波形幅值和潛伏期的測量.
統計學處理:所有數據均採用SPSS 10.0統計軟體對數據進行independentsamples t檢驗，分析組間及兩兩差異.
2結果
2.1視覺電生理學檢測CSNB大鼠rodERG和MaxERG的b波均未引出明顯波形，MaxERG的a波幅值較SD大鼠低，潛伏期較SD大鼠延長(P<0.05)；CSNB大鼠的OPs波畸形，子波不明確，僅在正常大鼠O2波的位置上有一明確的陽性波，而正常大鼠一般可引出5個子波. 對SD大鼠的O2波與CSNB大鼠OPs波最高陽性波進行比較，後者波幅值較對照組顯著降低(P<0.05)；PhotERG波幅降低，潛伏期延長；20 Hz FlickerERG的P1波幅值較對照組有非常顯著性降低(P<0.01，表1，圖1).表1SD大鼠和先天性靜止性夜盲（CSNB）大鼠視網膜電圖中部分參數的比較（略）
收藏