作者：覃容貴 吳建偉 國果 付萍
【摘要】 目的觀察蠅蛆殼聚糖的急性毒性反應。方法蠅蛆殼聚糖以最大濃度及最大給藥體積的藥液灌胃連續給藥3次。連續觀察14 d，記錄小鼠毒副反應情況。蠅蛆殼聚糖腹腔注射給藥1次，連續觀察14 d，記錄小鼠毒副反應情況。結果觀察14 d,灌胃給藥全部動物健存，小鼠體重與空白對照組差異無顯著性，未見任何毒性反應。 計算 蠅蛆殼聚糖最大給藥量為2 700 mg/ kg體重，相當於成人日用量的67.5倍。腹腔注射給藥亦未見任何毒性反應。結論蠅蛆殼聚糖毒性較小。
【關鍵詞】 蠅蛆殼聚糖 小鼠 急性毒性
甲殼素是地球上除纖維素之外最豐富的天然高分子聚合物。殼聚糖是甲殼素的脫乙醯化產物，是一種具有重要開發價值的天然多糖物質。殼聚糖以其獨有的特性日益成為全世界研究的熱點，在醫學、生物工程、化工、食品、化妝品、農業、環保等領域得到廣泛深入的研究［1］。昆蟲甲殼素也是甲殼素的重要來源之一。研究表明，干蛆中甲殼素的含量高於蝦蟹中甲殼素的含量，因此更具有可利用價值［2］。本實驗通過觀察對實驗動物一次給藥後所產生的毒性症狀及其程度，出現和消失的時間，死亡的發生率並計算出其最大給藥量，從而推測蠅蛆殼聚糖對人的急性毒性的強弱。
1 材料與儀器
1.1 藥物蠅蛆殼聚糖，自製。
1.2 動物 昆明種小鼠,清潔級,體重18～22 g，由貴陽醫學院實驗動物中心提供。
1.3 器材 電子 秤、量筒、1 ml注射器、灌胃針。
1.4 統計學處理 應用SPSS13.0統計軟體，各組數據均以±s表示，各項指標組間差異的顯著性比較採用Independent Samples T Test。
2 方法
2.1 灌胃的最大耐受量實驗
2.1.1 動物分組 取小鼠40隻,體重18～22 g，按體重隨機分成兩組，即蠅蛆殼聚糖給藥組和蒸餾水對照組，每組20隻，雌雄各半。以每籠5隻飼養。
2.1.2 藥物配製 蠅蛆殼聚糖臨用前用蒸餾水稀釋至所需濃度，以其能保持較好的流動性及可操作性，配製最大濃度為:33 mg/ml。
2.1.3 給藥途徑和容積 按每10 g體重0.3 ml藥液，分別於上午8時、10時和12時灌胃給藥，共連續給藥3次。累計給藥劑量為2700 mg/kg。給藥前禁食12 h，正常飲水。給藥量計算方法如下。
單次灌胃容積(ml)=〔動物體重(g) ×0.4〕 /10
單次灌入的藥量(g)=單次灌胃容積(ml)×0.03
相當於人用量的倍數=(灌入的總藥量×50×1 000)/(動物體重×22)
小鼠的最大耐受量=每隻小鼠的耐受藥量小鼠平均體重(20 g)×成人平均體重(50 000 g)成人每日用量
2.1.4 觀察毒性反應 給藥前後應觀察體重、進食、進水的情況，密切觀察異常毒性症狀，觀察症狀包括：①行為活動：不安定、多動、發聲；②神經系統反應：舉尾、震顫、痙攣、運動失調、姿態異常；③自主神經系統反應：眼球突出、流涎、流淚、排尿、下瀉、豎毛、皮膚變色、呼吸；④死亡。每日記錄體重、毒性反應和死亡情況，在給藥第1天每隔30 min到1 h觀察1次,以後每天觀察並稱體重1次，連續觀察14 d，記錄動物毒性反應及死亡分布情況。以體重變化、反應情況綜合評價實驗結果，以不產生死亡的最大劑量為最大耐受量，推算出相當於臨床用藥量的倍數。
2.2 腹腔注射的急性毒性實驗取20隻小鼠, 體重18～22 g，雌雄各半。實驗前12 h 禁食，不禁水，用配製濃度為30 mg/ ml的殼聚糖藥液進行腹腔注射，每隻小鼠注射量為0.3 ml(相當於900 mg/kg)。給藥後即刻觀察動物的反應情況，包括動物外觀、行為活動、精神狀態、食慾、大小便及其顏色、皮毛、鼻、眼、口有無異常分泌物以及死亡情況。在給藥第1天每隔30 min到1h觀察1次，以後每天觀察，連續觀察14 d，記錄動物毒性反應及死亡分布情況。
【摘要】 目的觀察蠅蛆殼聚糖的急性毒性反應。方法蠅蛆殼聚糖以最大濃度及最大給藥體積的藥液灌胃連續給藥3次。連續觀察14 d，記錄小鼠毒副反應情況。蠅蛆殼聚糖腹腔注射給藥1次，連續觀察14 d，記錄小鼠毒副反應情況。結果觀察14 d,灌胃給藥全部動物健存，小鼠體重與空白對照組差異無顯著性，未見任何毒性反應。 計算 蠅蛆殼聚糖最大給藥量為2 700 mg/ kg體重，相當於成人日用量的67.5倍。腹腔注射給藥亦未見任何毒性反應。結論蠅蛆殼聚糖毒性較小。
【關鍵詞】 蠅蛆殼聚糖 小鼠 急性毒性
甲殼素是地球上除纖維素之外最豐富的天然高分子聚合物。殼聚糖是甲殼素的脫乙醯化產物，是一種具有重要開發價值的天然多糖物質。殼聚糖以其獨有的特性日益成為全世界研究的熱點，在醫學、生物工程、化工、食品、化妝品、農業、環保等領域得到廣泛深入的研究［1］。昆蟲甲殼素也是甲殼素的重要來源之一。研究表明，干蛆中甲殼素的含量高於蝦蟹中甲殼素的含量，因此更具有可利用價值［2］。本實驗通過觀察對實驗動物一次給藥後所產生的毒性症狀及其程度，出現和消失的時間，死亡的發生率並計算出其最大給藥量，從而推測蠅蛆殼聚糖對人的急性毒性的強弱。
1 材料與儀器
1.1 藥物蠅蛆殼聚糖，自製。
1.2 動物 昆明種小鼠,清潔級,體重18～22 g，由貴陽醫學院實驗動物中心提供。
1.3 器材 電子 秤、量筒、1 ml注射器、灌胃針。
1.4 統計學處理 應用SPSS13.0統計軟體，各組數據均以±s表示，各項指標組間差異的顯著性比較採用Independent Samples T Test。
2 方法
2.1 灌胃的最大耐受量實驗
2.1.1 動物分組 取小鼠40隻,體重18～22 g，按體重隨機分成兩組，即蠅蛆殼聚糖給藥組和蒸餾水對照組，每組20隻，雌雄各半。以每籠5隻飼養。
2.1.2 藥物配製 蠅蛆殼聚糖臨用前用蒸餾水稀釋至所需濃度，以其能保持較好的流動性及可操作性，配製最大濃度為:33 mg/ml。
2.1.3 給藥途徑和容積 按每10 g體重0.3 ml藥液，分別於上午8時、10時和12時灌胃給藥，共連續給藥3次。累計給藥劑量為2700 mg/kg。給藥前禁食12 h，正常飲水。給藥量計算方法如下。
單次灌胃容積(ml)=〔動物體重(g) ×0.4〕 /10
單次灌入的藥量(g)=單次灌胃容積(ml)×0.03
相當於人用量的倍數=(灌入的總藥量×50×1 000)/(動物體重×22)
小鼠的最大耐受量=每隻小鼠的耐受藥量小鼠平均體重(20 g)×成人平均體重(50 000 g)成人每日用量
2.1.4 觀察毒性反應 給藥前後應觀察體重、進食、進水的情況，密切觀察異常毒性症狀，觀察症狀包括：①行為活動：不安定、多動、發聲；②神經系統反應：舉尾、震顫、痙攣、運動失調、姿態異常；③自主神經系統反應：眼球突出、流涎、流淚、排尿、下瀉、豎毛、皮膚變色、呼吸；④死亡。每日記錄體重、毒性反應和死亡情況，在給藥第1天每隔30 min到1 h觀察1次,以後每天觀察並稱體重1次，連續觀察14 d，記錄動物毒性反應及死亡分布情況。以體重變化、反應情況綜合評價實驗結果，以不產生死亡的最大劑量為最大耐受量，推算出相當於臨床用藥量的倍數。
2.2 腹腔注射的急性毒性實驗取20隻小鼠, 體重18～22 g，雌雄各半。實驗前12 h 禁食，不禁水，用配製濃度為30 mg/ ml的殼聚糖藥液進行腹腔注射，每隻小鼠注射量為0.3 ml(相當於900 mg/kg)。給藥後即刻觀察動物的反應情況，包括動物外觀、行為活動、精神狀態、食慾、大小便及其顏色、皮毛、鼻、眼、口有無異常分泌物以及死亡情況。在給藥第1天每隔30 min到1h觀察1次，以後每天觀察，連續觀察14 d，記錄動物毒性反應及死亡分布情況。